2) плодной крови
3) клетках амниотической жидкости
4) ворсинах хориона (+)
Ворсины хориона являются предпочтительным материалом для пренатальной диагностики лизосомных болезней накопления, поскольку содержат жизнеспособные клетки трофобласта с выраженной лизосомной ферментативной активностью. В полученной ткани можно непосредственно определить активность соответствующего фермента, например β-глюкоцереброзидазы, гексозаминидазы, α-L-идуронидазы или сфингомиелиназы, и выявить ее значительное снижение либо отсутствие. Исследование обычно выполняют в I триместре беременности, что позволяет установить диагноз раньше, чем при амниоцентезе.
Определение ферментов в бесклеточной амниотической жидкости менее надежно, поскольку концентрация фермента зависит от срока беременности, клеточного состава и особенностей его секреции. Клетки амниотической жидкости также пригодны для энзимодиагностики, однако их получение проводится позднее, а для анализа нередко требуется культивирование. Плодная кровь используется преимущественно для отдельных гематологических, иммунологических и биохимических исследований и связана с более высоким риском инвазивной процедуры.
| Биологический материал | Диагностические возможности | Преимущества | Ограничения |
|---|---|---|---|
| Ворсины хориона | Прямое измерение активности лизосомных ферментов; молекулярно-генетическое исследование | Диагностика в I триместре, высокая клеточность, быстрое получение результата | Необходимы контроль материнской контаминации и учет тканеспецифических особенностей активности фермента |
| Культивированные клетки ворсин хориона | Подтверждающая энзимодиагностика при сомнительном прямом анализе | Снижение влияния примесей и возможность повторных исследований | Увеличение срока выполнения анализа |
| Клетки амниотической жидкости | Определение активности ферментов в амниоцитах; ДНК-диагностика | Надежный альтернативный материал | Исследование проводится позднее; часто требуется культивирование клеток |
| Амниотическая жидкость без выделения клеток | Определение отдельных растворимых ферментов или метаболитов | Техническая простота после амниоцентеза | Низкая стабильность и диагностическая специфичность для большинства лизосомных болезней |
| Плодная кровь | Исследование форменных элементов, белков и отдельных ферментативных показателей | Возможность оценки системных проявлений заболевания | Поздний срок проведения и более высокий процедурный риск |
| Молекулярно-генетическое исследование | Выявление семейных патогенных вариантов в соответствующем гене | Высокая специфичность, возможность подтверждения энзимного результата | Требует знания причинных вариантов или полноценного анализа гена |
Оптимальная диагностика наследственных лизосомных болезней сочетает энзимный и молекулярно-генетический методы. Сниженную активность фермента сопоставляют с результатами исследования ДНК, семейным анамнезом и данными обследования родителей. Такой подход позволяет отличить истинное заболевание от псевдодефицитных состояний и лабораторных артефактов. При использовании ворсин хориона обязательны контроль качества образца и исключение примеси материнских клеток.