2) азур-эозином по Лейшману
3) по Цилю — Нильсону (+)
4) берлинской лазурью
Правильный ответ — окраска по Цилю—Нильсену. Метод предназначен для выявления кислотоустойчивых бактерий, прежде всего микобактерий комплекса Mycobacterium tuberculosis, в мазках мокроты. Их клеточная стенка содержит большое количество миколовых кислот и других липидов, поэтому после окрашивания карболовым фуксином они сохраняют краситель при обработке кислотно-спиртовым обесцвечивающим раствором.
При положительной реакции микобактерии видны как тонкие красные или розово-красные палочки на контрастном синем фоне, создаваемом метиленовым синим. Предварительное прогревание препарата способствует проникновению карболового фуксина через липидную клеточную стенку. Метод позволяет обнаружить кислотоустойчивые бактерии и ориентировочно оценить их количество, однако не обеспечивает видовой идентификации: для подтверждения используют культуральное исследование и молекулярно-генетические методы.
| Метод или реактив | Основная диагностическая цель | Характерный результат | Значение при исследовании мокроты |
|---|---|---|---|
| Циль—Нильсен | Выявление кислотоустойчивых бактерий | Красные палочки на синем фоне | Микроскопическое обнаружение микобактерий, включая возбудителя туберкулёза |
| Карбольный фуксин | Первичное окрашивание кислотоустойчивых микроорганизмов | Интенсивное окрашивание клеток в красный цвет | Проникает через липидную клеточную стенку, особенно при прогревании |
| Кислотно-спиртовое обесцвечивание | Дифференциация кислотоустойчивых и некислотоустойчивых клеток | Кислотоустойчивые бактерии сохраняют основной краситель | Ключевой этап, определяющий специфичность метода |
| Метиленовый синий | Контрастное окрашивание фона и некислотоустойчивой флоры | Синий фон, на котором выделяются красные микобактерии | Используется как контрастный, а не основной специфический краситель |
| Азур-эозин по Лейшману | Окрашивание клеточных элементов крови и общей морфологии мазка | Различная окраска ядер, цитоплазмы и гранул | Не предназначен для надёжного выявления кислотоустойчивых бактерий |
| Берлинская лазурь | Выявление трёхвалентного железа и гемосидерина | Синие или сине-зелёные гранулы | Не является методом диагностики микобактериальной инфекции |
Обнаружение кислотоустойчивых палочек в мокроте имеет важное эпидемиологическое значение, поскольку указывает на возможное наличие заразной формы туберкулёза. Отрицательный результат не исключает инфекцию при малом количестве бактерий или неудовлетворительном качестве материала. Для повышения чувствительности применяют люминесцентную окраску аурамином-родамином, а для подтверждения вида и лекарственной устойчивости — ПЦР и культуральные методы.