2) в течение первых 6 часов хранения
3) не позже 30-40 минут хранения в пробирке с ЭДТА (+)
4) в течение первых 12 часов хранения
Для достоверной оценки лейкоцитарной формулы и морфологии форменных элементов мазок следует готовить непосредственно после взятия крови, оптимально — не позднее 30–40 минут нахождения образца в пробирке с ЭДТА. Именно этот интервал соответствует варианту 3. ЭДТА связывает ионы кальция и предотвращает свертывание, однако не прекращает метаболические и дегенеративные изменения клеток in vitro.
При более длительном хранении изменяются форма и структура лейкоцитов: появляются вакуолизация цитоплазмы, набухание клеток, нарушения ядерной сегментации и хроматиновой структуры, псевдогиперсегментация нейтрофилов, ухудшается различимость гранул. Возможны также агрегация тромбоцитов и появление артефактов, затрудняющих подсчет отдельных популяций. Такие изменения могут имитировать патологические признаки и приводить к ошибочной оценке относительного содержания нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов и базофилов.
| Срок от взятия крови | Состояние образца | Допустимость для морфологической оценки |
|---|---|---|
| Сразу после взятия | Клеточные структуры максимально соответствуют состоянию in vivo | Оптимальный срок для приготовления мазка |
| До 30–40 минут в ЭДТА | Антикоагулянт сохраняет жидкое состояние крови, выраженные клеточные артефакты обычно отсутствуют | Предпочтительный интервал для лейкоцитарной формулы и морфологии |
| Около 1–2 часов | Начинаются изменения клеточной мембраны, цитоплазмы и ядерного хроматина | Результат требует осторожной интерпретации |
| 2–3 часа и более | Усиливаются вакуолизация, набухание и дегенерация лейкоцитов, возможны изменения сегментации нейтрофилов | Нежелательно для надежной морфологической оценки |
| До 6 часов | Часть показателей общего анализа крови может сохраняться приемлемой, но морфология клеток уже искажена | Допустимо лишь для ограниченных задач при валидации методики |
| До 12 часов | Нарастают артефакты хранения, включая клеточную дегенерацию и изменение распределения популяций | Не подходит для корректной ручной оценки мазка |
Приготовление мазка в установленный срок особенно важно при подозрении на острый лейкоз, выраженный лейкоцитоз, цитопении или наличие патологических клеток. При задержке необходимо указать время между взятием крови и приготовлением мазка, поскольку это влияет на интерпретацию результата. Референсные сроки могут уточняться локальной лабораторной валидацией, но для первичной морфологической оценки приоритетом остается максимально раннее приготовление препарата.