2) полимеразную цепную реакцию
3) хроматографию
4) цитологический метод
Для выявления антител к ВИЧ применяют иммуноферментный анализ (ИФА), основанный на специфическом взаимодействии антител пациента с антигенами вируса, фиксированными на твердой фазе. После образования комплекса добавляют фермент-меченые антитела против иммуноглобулинов человека; последующее внесение субстрата вызывает окрашивание, интенсивность которого регистрируется фотометрически и сравнивается с установленным пороговым значением. Специфичность исследования обеспечивается использованием рекомбинантных или синтетических антигенов ВИЧ-1 и ВИЧ-2.
Современные лабораторные системы часто представлены комбинированными тестами четвертого поколения, одновременно выявляющими антитела к ВИЧ-1/ВИЧ-2 и антиген p24. Это сокращает диагностическое окно по сравнению с тестами, определяющими только антитела, однако в ранний период после инфицирования результат может оставаться отрицательным. Реактивный результат скринингового ИФА не является окончательным диагнозом и требует подтверждения дополнительным иммунологическим исследованием и, при необходимости, молекулярно-биологическим тестированием.
Полимеразная цепная реакция выявляет нуклеиновые кислоты ВИЧ — РНК вируса или провирусную ДНК, поэтому относится к методам непосредственного обнаружения возбудителя, а не антител. Хроматографические быстрые тесты также могут использовать иммунологический принцип, но термин хроматография не обозначает основной лабораторный метод стандартного серологического скрининга. Цитологическое исследование для обнаружения антител к ВИЧ не применяется.
| Метод | Что выявляет | Основной диагностический принцип | Типичное применение | Ограничения |
|---|---|---|---|---|
| ИФА | Антитела к ВИЧ; в тестах 4-го поколения также антиген p24 | Ферментная индикация реакции антиген–антитело с фотометрической регистрацией | Первичный лабораторный скрининг доноров и обследуемых лиц | Возможны результаты в период диагностического окна и неспецифическая реактивность |
| ПЦР | РНК ВИЧ или провирусную ДНК | Амплификация специфического участка нуклеиновой кислоты | Ранняя диагностика, определение вирусной нагрузки, обследование детей, рожденных от инфицированных матерей | Не определяет антитела; требует специализированного оборудования и контроля контаминации |
| Иммунохроматографический экспресс-тест | Чаще антитела к ВИЧ, иногда антиген и антитела | Миграция образца по мембране и образование видимой тестовой полосы | Быстрое обследование вне лаборатории или при ограниченных ресурсах | Чувствительность и специфичность зависят от набора; реактивный результат требует подтверждения |
| Подтверждающий иммунологический тест | Антитела к отдельным антигенам ВИЧ-1/ВИЧ-2 | Дифференцированное выявление антител к вирусным белкам | Подтверждение реактивного скринингового результата | Может быть неопределенным при ранней инфекции или перекрестной реактивности |
| Иммуноблоттинг или линейный иммуноблот | Антитела к отдельным белкам вируса | Связывание антител с разделенными или нанесенными на полоску антигенами | Уточнение специфичности серологической реакции | В ряде современных алгоритмов заменяется дифференцирующими иммуноанализами |
| Цитологический метод | Клеточные изменения | Микроскопическая оценка клеточного состава и морфологии | Исследование воспалительных, диспластических и опухолевых процессов | Не предназначен для выявления антител или нуклеиновых кислот ВИЧ |
Интерпретация результата должна учитывать срок предполагаемого инфицирования, вид образца и характеристики примененного тест-системы. При отрицательном результате, полученном вскоре после возможного заражения, может потребоваться повторное обследование после завершения диагностического окна. Реактивный скрининговый результат регистрируют как предварительный до проведения подтверждающего алгоритма. Совокупная оценка серологических и молекулярных данных позволяет отличить истинную инфекцию от раннего периода заболевания и неспецифической реактивности.