2) дульцит
3) инозит
4) глюкоза (+)
В классическом мочевинном агаре Кристенсена дыхательным субстратом служит глюкоза. Она является доступным источником углерода и энергии для роста микроорганизмов, включается в гликолиз и далее может окисляться в цикле трикарбоновых кислот и дыхательной цепи. Наличие глюкозы обеспечивает достаточную метаболическую активность культуры в условиях дифференциально-диагностического исследования.
Основной диагностический субстрат этой среды — мочевина, а не глюкоза: она предназначена для выявления уреазной активности. При наличии уреазы мочевина гидролизуется с образованием аммиака и диоксида углерода; аммиак повышает pH среды, что вызывает переход фенолового красного из желтоватой окраски в розово-красную или малиновую. Поэтому глюкоза выполняет преимущественно трофическую и энергетическую функцию, а мочевина определяет специфическую биохимическую реакцию.
Лактоза, дульцит и инозит могут использоваться как углеводные субстраты в других средах для изучения ферментации или окисления углеводов, однако в стандартной рецептуре среды Кристенсена они не являются основным дыхательным субстратом. Разграничение этих функций важно для правильной интерпретации состава среды: глюкоза поддерживает рост бактерий, а изменение pH связано прежде всего с уреазным расщеплением мочевины.
| Компонент или результат | Функция в среде | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Глюкоза | Дыхательный субстрат, источник углерода и энергии | Обеспечивает рост и метаболическую активность исследуемой культуры |
| Мочевина | Специфический субстрат для уреазы | При гидролизе образуются аммиак и диоксид углерода |
| Аммиак | Щелочной продукт уреазной реакции | Повышает pH среды и формирует положительную реакцию |
| Феноловый красный | Кислотно-основный индикатор | Жёлтая окраска соответствует кислой реакции, розово-красная — ощелачиванию |
| Фосфатный буфер | Стабилизация исходного pH среды | Снижает влияние небольших колебаний кислотности на результат исследования |
| Уреазоположительная культура | Интенсивное расщепление мочевины | Появление розово-красной окраски в зоне роста в установленный срок инкубации |
| Уреазоотрицательная культура | Отсутствие образования значимого количества аммиака | Щелочного сдвига и характерного покраснения среды не происходит |
При постановке реакции необходимо использовать чистую культуру и контролировать срок инкубации, поскольку чрезмерно длительное выращивание может затруднить оценку окраски. Результат следует интерпретировать совместно с интенсивностью роста и исходным цветом среды. Таким образом, глюкоза отвечает за энергетическое обеспечение микроорганизмов, а изменение окраски является показателем уреазной активности.