2) иммунохимический (+)
3) масс-спектрометрия
4) газожидкостная хроматография
Иммунохимические методы относятся к экспресс-методам химико-токсикологического исследования, поскольку позволяют получить результат в течение нескольких минут или десятков минут при минимальной пробоподготовке. Их основа — специфическое взаимодействие антитела с антигеном либо с химически близким соединением-антигеном; изменение окраски, флуоресценции или другого регистрируемого сигнала сопоставляют с установленным пороговым значением (cut-off). На практике применяют иммунохроматографические тесты, иммуноферментный анализ и другие варианты скрининга, чаще всего для мочи, крови или слюны.
Иммунохимический анализ обычно является качественным или полуколичественным: он показывает наличие вещества или его метаболитов выше пороговой концентрации, но не всегда позволяет установить точное соединение и его концентрацию. Результат может быть искажен перекрёстной реактивностью антител, лекарственными препаратами и особенностями метаболизма, поэтому положительный скрининговый ответ подлежит подтверждению хроматографическими или масс-спектрометрическими методами. Высокоэффективная жидкостная, газожидкостная хроматография и масс-спектрометрия обеспечивают более высокую специфичность и аналитическую точность, но обычно требуют более сложной аппаратуры, пробоподготовки и времени.
| Метод | Основной принцип | Типичный результат | Роль в исследовании | Основное ограничение |
|---|---|---|---|---|
| Иммунохимический анализ | Реакция антитела с веществом или его метаболитом с регистрацией сигнала | Положительно/отрицательно , иногда ориентировочная концентрация | Быстрый первичный скрининг | Перекрёстная реактивность и зависимость от порога cut-off |
| Высокоэффективная жидкостная хроматография | Разделение компонентов в жидкой подвижной фазе по сорбенту колонки | Хроматограмма и количественный результат | Подтверждающее или количественное исследование | Необходимость пробоподготовки и квалифицированной интерпретации |
| Газожидкостная хроматография | Разделение летучих и термостабильных соединений в газовой фазе | Хроматографический профиль, количественная оценка | Выявление спиртов, растворителей и ряда лекарственных веществ | Неприменима или ограниченно применима к нелетучим и термолабильным соединениям |
| Масс-спектрометрия | Ионизация вещества и анализ ионов по отношению массы к заряду | Молекулярно-структурная идентификация и количественная оценка | Высокоспецифичное подтверждение результата | Высокая стоимость оборудования и сложность методики |
| Скрининговый результат | Сравнение аналитического сигнала с установленным cut-off | Предварительное заключение о возможном присутствии вещества | Ориентировочная оценка в неотложной ситуации | Не заменяет окончательную идентификацию токсиканта |
| Подтверждающее исследование | Инструментальная идентификация по времени удерживания, спектру и/или ионным переходам | Достоверное установление вещества и его концентрации | Экспертное заключение и судебно-медицинская оценка | Более длительный аналитический цикл |
Экспресс-иммунохимический тест особенно важен при подозрении на острое отравление, когда предварительная информация необходима для неотложной тактики. Отрицательный результат не исключает интоксикацию, если концентрация ниже порога обнаружения, вещество не входит в тест-панель или период его выявления ограничен. Положительный результат следует рассматривать как основание для целевого подтверждающего анализа, а не как окончательное доказательство присутствия конкретного токсиканта.