2) любом большом квадрате
3) 3 квадратах, расположенных по диагонали
4) 5 больших квадратах, расположенных по диагонали (+)
Подсчёт эритроцитов в камере Горяева проводят в пяти больших квадратах, расположенных по диагонали. Каждый из них разделён на 16 малых квадратов, поэтому фактически анализируется 80 малых квадратов. Такой выбор участка обеспечивает стандартизированный и достаточно репрезентативный объём клеточной суспензии, снижая влияние неравномерного распределения эритроцитов в камере.
При стандартной глубине камеры 0,1 мм площадь одного большого квадрата составляет 0,04 мм², а объём пяти квадратов — 0,02 мм³. При типичном разведении крови 1:200 концентрацию рассчитывают по формуле: X = N × 200 / 0,02 = N × 10 000 клеток/мм³ (или клеток/мкл), где N — число подсчитанных эритроцитов. Во время подсчёта придерживаются единого правила границ: обычно учитывают клетки внутри квадрата и касающиеся верхней и левой линий, не учитывая клетки на нижней и правой границах, чтобы исключить повторный подсчёт.
Подсчёт только в малых квадратах одного большого участка или в трёх квадратах не обеспечивает необходимого объёма выборки. Выбор любого большого квадрата нарушает методику, поскольку не гарантирует сопоставимости результатов и равномерного охвата сетки. Поэтому правильным является стандартизированный подсчёт в пяти больших квадратах, размещённых по диагонали.
| Параметр методики | Стандартное значение | Практическое значение |
|---|---|---|
| Глубина камеры | 0,1 мм | Определяет объём исследуемой жидкости над сеткой. |
| Размер одного большого квадрата | 0,2 × 0,2 мм | Площадь квадрата равна 0,04 мм². |
| Выбираемый участок | 5 больших квадратов по диагонали | Обеспечивает стандартизированный и репрезентативный подсчёт. |
| Количество малых квадратов | 80 | В пяти больших квадратах содержится по 16 малых квадратов. |
| Исследуемый объём | 0,02 мм³ | Рассчитывается как площадь пяти квадратов, умноженная на глубину камеры. |
| Стандартное разведение крови | Обычно 1:200 | Снижает плотность клеток и позволяет раздельно подсчитывать эритроциты. |
| Правило учёта пограничных клеток | Верхняя и левая границы включаются, нижняя и правая исключаются | Предотвращает повторное включение одних и тех же клеток. |
| Расчёт концентрации | X = N × 200 × 50 | Результат выражают в клетках/мм³ или клетках/мкл; коэффициент меняется при ином разведении или объёме. |
Достоверность результата зависит не только от числа квадратов, но и от правильного заполнения камеры, отсутствия пузырьков и равномерного распределения клеток. При выраженной неоднородности или большом расхождении между повторными подсчётами исследование выполняют повторно. Полученное количество эритроцитов интерпретируют совместно с гемоглобином, гематокритом и эритроцитарными индексами.