2) циркулирующие в крови
3) фиксированные на эритроцитах (+)
4) циркулирующие в крови и фиксированные на эритроцитах
Прямая проба Кумбса, или прямой антиглобулиновый тест, выявляет иммуноглобулины и/или компоненты комплемента, уже фиксированные на мембране эритроцитов в организме. Для исследования эритроциты пациента отмывают от свободных белков плазмы, затем добавляют антиглобулиновый реагент, содержащий антитела к иммуноглобулинам человека и компонентам комплемента. Если на эритроцитах присутствуют IgG или C3-фрагменты, происходит их связывание антиглобулиновым реагентом и видимая агглютинация.
Именно поэтому правильным является указание на антитела, фиксированные на эритроцитах. Свободные, циркулирующие в сыворотке антитела определяет непрямая проба Кумбса, при которой исследуемую сыворотку инкубируют с тестовыми эритроцитами, а затем выявляют образовавшееся покрытие клеток иммуноглобулинами. Прямая проба используется при подозрении на аутоиммунную гемолитическую анемию, гемолитическую болезнь новорождённых, посттрансфузионную гемолитическую реакцию и иммунные лекарственно-индуцированные гемолизы.
Термины полные и неполные антитела характеризуют преимущественно их способность непосредственно вызывать агглютинацию эритроцитов и не являются основным принципом интерпретации прямого теста. Наиболее часто на эритроцитах выявляются неполные IgG-антитела, которые без антиглобулинового реагента могут не давать видимой агглютинации. Положительная реакция свидетельствует об иммунологическом сенсибилизировании эритроцитов, но оценивается совместно с клиническими признаками гемолиза, уровнем гемоглобина, билирубина, лактатдегидрогеназы и результатами исследования мазка крови.
| Метод или объект исследования | Исследуемый материал | Что выявляется | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Прямая проба Кумбса | Эритроциты пациента | IgG и/или компоненты комплемента, фиксированные на эритроцитах in vivo | Подтверждает иммунное покрытие эритроцитов; применяется при иммунном гемолизе |
| Непрямая проба Кумбса | Сыворотка или плазма пациента | Свободные алло- или аутоантитела, способные связаться с эритроцитами in vitro | Скрининг антител перед переливанием крови, подбор совместимой крови, обследование беременных |
| IgG-антитела | Поверхность эритроцита | Неполные антитела, обычно не вызывающие спонтанной агглютинации | Выявляются после добавления антиглобулинового реагента; типичны для тёплой аутоиммунной гемолитической анемии |
| IgM-антитела | Сыворотка или мембрана эритроцита | Полные, часто агглютинирующие антитела | Могут активировать комплемент; характерны для ряда холодовых иммунных гемолизов |
| Фрагменты комплемента C3 | Мембрана эритроцита | Компоненты комплемента, фиксированные в ходе иммунной реакции | Возможны при холодовой агглютининовой болезни и некоторых лекарственных иммунных реакциях |
| Положительная реакция | Отмытые эритроциты после добавления реагента | Агглютинация эритроцитов | Признак наличия на клетках IgG и/или комплемента; степень реакции оценивают полуколичественно |
Прямая проба Кумбса не показывает концентрацию антител в плазме и не заменяет оценку активности гемолиза. Отрицательный результат не исключает иммунную гемолитическую анемию при низкой плотности антител, преимущественном участии IgA или технических ограничениях метода. При клиническом подозрении используют более чувствительные моноспецифические реагенты к IgG, IgA и компонентам комплемента. Интерпретация должна учитывать анамнез переливаний, беременность, лекарственную терапию и лабораторные признаки разрушения эритроцитов.