2) нитритов из растительных объектов
3) металлических ядов из биологического материала
4) лекарственных веществ из биожидкостей (+)
Прямая жидкость–жидкостная экстракция органическим растворителем применяется для изолирования лекарственных веществ из биологических жидкостей, поскольку многие лекарственные соединения способны распределяться между водной и органической фазами. Эффективность извлечения определяется коэффициентом распределения и степенью ионизации вещества: неионизированная, преимущественно липофильная форма лучше переходит из плазмы, сыворотки или мочи в несмешивающийся с водой органический растворитель.
Перед экстракцией pH биожидкости подбирают с учётом кислотно-основных свойств аналита. Слабые основания переводят в молекулярную форму подщелачиванием, а слабые кислоты — подкислением; после встряхивания и разделения фаз органический слой отделяют, упаривают и исследуют хроматографическими, спектрофотометрическими или масс-спектрометрическими методами. Такой подход позволяет одновременно концентрировать лекарственное вещество и уменьшать влияние белков, солей и других компонентов биологической матрицы.
Другие указанные группы токсикантов требуют иных принципов пробоподготовки. Угарный газ определяют по содержанию карбоксигемоглобина, металлические яды изолируют после минерализации биоматериала, а нитриты обычно переводят в окрашенные производные и выявляют фотометрическими реакциями. Поэтому жидкость–жидкостная экстракция наиболее обоснована именно для органических лекарственных соединений, обладающих подходящей растворимостью и распределением между фазами.
| Объект или аналит | Основной принцип изолирования или определения | Почему подход применим |
|---|---|---|
| Липофильные лекарственные вещества | Экстракция органическим растворителем | Высокий коэффициент распределения в пользу органической фазы |
| Слабые основания | Подщелачивание с последующей экстракцией | Образуется неионизированная молекулярная форма, лучше растворимая в органической фазе |
| Слабые кислоты | Подкисление с последующей экстракцией | Снижается степень диссоциации и повышается извлечение органическим растворителем |
| Угарный газ в крови | Определение карбоксигемоглобина спектральными или газометрическими методами | Токсикант связан с гемоглобином и не изолируется обычной жидкость–жидкостной экстракцией |
| Металлические яды | Минерализация биоматериала с последующим атомно-спектрометрическим анализом | Неорганические элементы необходимо освободить от органической матрицы |
| Нитриты в растительных объектах | Водная экстракция и фотометрическая реакция диазотирования | Нитрит-ионы гидрофильны и определяются после образования окрашенного азосоединения |
Результативность жидкость–жидкостной экстракции зависит от pH, полярности растворителя, соотношения объёмов фаз и числа последовательных извлечений. Несколько экстракций небольшими порциями растворителя обычно эффективнее одной экстракции тем же суммарным объёмом. Для полярных, термолабильных или прочно связанных с белками препаратов могут потребоваться предварительная депротеинизация, гидролиз конъюгатов либо твердофазная экстракция. Полученный экстракт служит подготовленной пробой для идентификации и количественного определения лекарственных веществ.