2) цитрат натрия
3) гипертонический раствор хлорида натрия
4) дистиллированная вода
При определении группы крови изотонический раствор хлорида натрия используют после первичной оценки реакции для проверки истинности агглютинации. Раствор концентрации 0,9% поддерживает физиологическую осмолярность, не повреждает эритроциты и не вызывает их спонтанного склеивания. При наличии специфической реакции антигенов эритроцитов с антителами реагента образуются устойчивые агглютинаты, которые сохраняются после добавления физиологического раствора.
Основной диагностический критерий — поведение эритроцитарных скоплений после разведения реакционной смеси. Истинная иммунная агглютинация, обусловленная взаимодействием антигенов A или B с соответствующими антителами, не исчезает. Псевдоагглютинация, в том числе феномен монетных столбиков или неспецифическое оседание клеток, обычно распадается после добавления раствора натрия хлорида и осторожного перемешивания. Поэтому физиологический раствор повышает достоверность визуальной оценки и помогает избежать ошибочного определения группы.
Цитрат натрия применяется преимущественно как антикоагулянт и не является стандартным реагентом для подтверждения реакции агглютинации. Гипертонический раствор может изменять форму и объем эритроцитов, а дистиллированная вода вызывает их осмотический гемолиз. Окончательное заключение делают с учетом результатов реакций с анти-A и анти-B, а при сомнительной картине — после контрольной проверки и соблюдения условий методики.
| Реакция с реагентами | Первичная картина | После добавления 0,9% NaCl | Интерпретация |
|---|---|---|---|
| Анти-A + , анти-B − | Скопления эритроцитов в капле с анти-A | Агглютинаты сохраняются | Группа A (II) |
| Анти-A − , анти-B + | Скопления эритроцитов в капле с анти-B | Агглютинаты сохраняются | Группа B (III) |
| Анти-A + , анти-B + | Агглютинация в обеих реакционных каплях | Реакция остается отчетливой | Группа AB (IV) |
| Анти-A − , анти-B − | Видимого склеивания нет | Картина не изменяется | Группа O (I) |
| Сомнительные мелкие скопления | Нечеткая агрегация или монетные столбики | При псевдоагглютинации скопления распадаются | Неспецифическая реакция; результат требует уточнения |
Добавление изотонического раствора натрия хлорида является этапом верификации, а не самостоятельной реакцией определения группы крови. Оно позволяет отличить специфическое антитело-зависимое склеивание эритроцитов от неспецифической агрегации. Сохранение агглютинатов подтверждает достоверность положительной реакции с соответствующим реагентом. При несоответствии результатов необходимы повторное исследование, контроль реагентов и исключение технических ошибок.