2) непрямой иммунофлюоресценции
3) вирусологический
4) иммунохимический (+)
Иммунохимический метод основан на специфическом взаимодействии антител с антигенами SARS-CoV-2. При исследовании мазка из носо- и ротоглотки выявляют вирусные белки, чаще всего нуклеокапсидный антиген, с помощью иммунохроматографического экспресс-теста или другого варианта иммуноанализа. Обнаружение антигена непосредственно указывает на присутствие возбудителя в исследуемом материале и потому относится к методам этиологической диагностики.
Наибольшая диагностическая ценность антигенного исследования отмечается в первые дни заболевания, когда вирусная нагрузка в дыхательных путях максимальна. Положительный результат при наличии клинических проявлений позволяет подтвердить текущую инфекцию, однако отрицательный результат не исключает COVID-19 при низкой концентрации вируса или неправильном взятии материала; в таких случаях применяют молекулярно-генетическое исследование методом ПЦР. Серологическое выявление антител характеризует иммунный ответ и не всегда свидетельствует об активной инфекции.
Другие перечисленные подходы имеют ограниченное значение для непосредственной этиологической верификации COVID-19. Световая микроскопия не позволяет надёжно обнаружить коронавирус, непрямая иммунофлюоресценция преимущественно выявляет антитела, а вирусологическое культивирование SARS-CoV-2 требует специализированной лаборатории высокого уровня биологической безопасности и не используется для рутинной диагностики. Поэтому в рамках предложенной классификации правильным является иммунохимический метод.
| Метод | Что выявляет | Материал или особенности | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Иммунохимический антигенный тест | Белки SARS-CoV-2, преимущественно нуклеокапсидный антиген | Мазок из носоглотки или ротоглотки; результат обычно получают быстро | Прямая этиологическая диагностика текущей инфекции, особенно эффективна при высокой вирусной нагрузке |
| ПЦР и другие молекулярно-генетические методы | РНК SARS-CoV-2 после обратной транскрипции и амплификации | Материал дыхательных путей; высокая аналитическая чувствительность | Основной подтверждающий метод при сомнительном или отрицательном антигенном тесте |
| Серологический иммуноанализ | IgM, IgG и другие антитела к антигенам вируса | Сыворотка или плазма крови; антитела формируются не сразу | Оценка перенесённой инфекции или иммунного ответа, но не надёжное подтверждение ранней острой фазы |
| Непрямая иммунофлюоресценция | Антитела пациента по их связыванию с антигеном | Требует микроскопической регистрации флуоресценции и стандартизованных реагентов | Преимущественно серологическая диагностика; ограничена для раннего выявления возбудителя |
| Вирусологический метод | Жизнеспособный инфекционный вирус | Культивирование в клеточной культуре в условиях повышенной биобезопасности | Научное и специализированное применение, не рутинный способ диагностики |
| Световая микроскопия | Морфологические изменения клеток и микроорганизмы, доступные оптическому разрешению | Вирионы SARS-CoV-2 не могут быть достоверно идентифицированы обычной световой микроскопией | Не используется для специфической этиологической диагностики COVID-19 |
Интерпретация антигенного теста должна учитывать срок болезни, качество взятия мазка и эпидемиологическую вероятность инфекции. Положительный результат обычно имеет высокую клиническую значимость при соответствующей симптоматике и контакте с заболевшим. Отрицательный результат при сохраняющемся подозрении требует повторного тестирования или подтверждения методом ПЦР. Таким образом, иммунохимическое выявление антигена является быстрым способом прямого обнаружения возбудителя, а молекулярное исследование повышает чувствительность диагностики.