2) определении антител к возбудителю (+)
3) определении резистентности возбудителя
4) культивировании возбудителя в культуре клеток
Серологическая диагностика ОРВИ основана на выявлении специфического иммунного ответа организма — антител к антигенам возбудителя в сыворотке крови. Исследование проводят с помощью ИФА, реакции иммунофлуоресценции, реакции нейтрализации и других иммунологических методов. В зависимости от сроков заболевания определяют иммуноглобулины M (IgM), которые могут появляться в ранние сроки, и иммуноглобулины G (IgG), свидетельствующие о сформированном или перенесённом иммунном ответе.
Наиболее убедительным критерием недавней инфекции является сероконверсия или нарастание титра специфических антител IgG в парных сыворотках не менее чем в 4 раза. Образцы обычно исследуют в остром периоде и через 10–14 дней либо несколько недель после начала заболевания. Однократное выявление IgG не позволяет достоверно отличить текущую инфекцию от ранее перенесённой инфекции или поствакцинального иммунитета, а результаты определения IgM могут требовать подтверждения из-за возможных перекрёстных реакций.
Определение генома возбудителя методом ПЦР относится к молекулярной диагностике, культивирование в культуре клеток — к вирусологическим методам, а оценка резистентности характеризует чувствительность изолированного вируса к противовирусным препаратам. Эти методы не являются определением антительного ответа и поэтому не соответствуют понятию серологической диагностики. При этом в клинической практике для раннего подтверждения ОРВИ чаще используют ПЦР или выявление вирусного антигена, тогда как серология особенно важна при ретроспективной диагностике, эпидемиологических исследованиях и инфекциях с поздним обращением пациента.
| Метод | Что выявляется | Оптимальные сроки | Основное диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Серология | Специфические IgM и IgG к антигенам вируса | IgM — обычно с первых дней иммунного ответа; IgG — в динамике, особенно в парных сыворотках | Подтверждение недавней или перенесённой инфекции; диагностично четырёхкратное нарастание титра IgG или сероконверсия |
| ПЦР и другие методы амплификации нуклеиновых кислот | РНК или ДНК возбудителя | Наиболее информативны в первые дни заболевания | Быстрое подтверждение текущей инфекции и идентификация конкретного вируса |
| Экспресс-тест на антиген | Вирусные антигены в мазке из дыхательных путей | Острый период при достаточной вирусной нагрузке | Быстрый, но менее чувствительный метод; отрицательный результат не всегда исключает инфекцию |
| Культура клеток | Репродукция жизнеспособного вируса в клеточной культуре | Требует специально взятого материала и сохранения инфекционности вируса | Вирусологическое подтверждение и научные исследования; ограниченно применяется в рутинной диагностике |
| Определение резистентности | Генетические или фенотипические признаки устойчивости к противовирусным препаратам | После выявления возбудителя, при соответствующих клинических показаниях | Помогает выбрать терапию, но не устанавливает сам факт серологического ответа |
| Однократное выявление IgG | Сформированные специфические антитела | На любом этапе, включая период после выздоровления | Чаще указывает на прошлую инфекцию или вакцинацию и само по себе не доказывает острый процесс |
Таким образом, ключевым объектом серологического исследования являются антитела, а не сам вирус или его геном. Интерпретация результата должна учитывать день болезни, наличие вакцинации, иммунный статус пациента и динамику показателей в парных сыворотках. Отрицательная серология в первые дни заболевания не исключает ОРВИ, поскольку специфический иммунный ответ ещё мог не сформироваться. Для решения вопроса о текущей инфекции серологические данные при необходимости сопоставляют с результатами ПЦР, антигенного тестирования и клинической картиной.