2) титрованием
3) фотометрией
4) электрофорезом (+)
Электрофорез белков сыворотки основан на разделении белковых молекул в электрическом поле в зависимости от их суммарного заряда, размера и формы. При щелочном значении pH большинство сывороточных белков приобретает отрицательный заряд и перемещается к аноду с различной скоростью. После окрашивания и денситометрического анализа формируется электрофореграмма с основными фракциями: альбумином, α1-, α2-, β- и γ-глобулинами.
Метод позволяет оценить не только относительное и абсолютное содержание фракций, но и характер их распределения. Это имеет диагностическое значение при воспалительных заболеваниях, патологии печени, нефротическом синдроме, иммунодефицитах и моноклональных гаммапатиях. Например, узкий интенсивный пик в γ- или β-зоне может указывать на продукцию моноклонального иммуноглобулина, тогда как широкое повышение γ-глобулинов характерно для поликлональной активации иммунной системы.
| Белковая фракция | Основные компоненты | Диагностическое значение изменений |
|---|---|---|
| Альбумин | Альбумин сыворотки | Снижается при нарушении синтетической функции печени, нефротическом синдроме, белковой недостаточности и системном воспалении |
| α1-глобулины | α1-антитрипсин, α1-кислый гликопротеин | Повышаются при острофазовом ответе; снижение возможно при дефиците α1-антитрипсина |
| α2-глобулины | Гаптоглобин, церулоплазмин, α2-макроглобулин | Повышаются при остром воспалении и нефротическом синдроме; гаптоглобин снижается при внутрисосудистом гемолизе |
| β-глобулины | Трансферрин, компоненты комплемента, β-липопротеины | Изменяются при железодефиците, нарушениях липидного обмена и активации системы комплемента |
| γ-глобулины | Преимущественно иммуноглобулины | Поликлональное повышение наблюдается при хронических инфекциях и аутоиммунных заболеваниях; снижение — при иммунодефицитах |
| Моноклональный компонент | Однородный иммуноглобулин или его фрагменты | Узкий М-пик требует исключения множественной миеломы, макроглобулинемии и других моноклональных гаммапатий |
Иммуноферментный анализ предназначен преимущественно для количественного определения конкретного антигена или антитела, но не для общего разделения белкового спектра. Фотометрия применяется для измерения концентрации общего белка или отдельных аналитов после химической реакции, а титрование основано на определении вещества по объёму реагента известной концентрации. При выявлении подозрительного моноклонального пика электрофорез дополняют иммунофиксацией, которая устанавливает тип тяжёлых и лёгких цепей иммуноглобулина.