2) определения активности фагоцитов
3) идентификации и количественного учета субпопуляций иммунокомпетентных клеток (+)
4) определения концентрации иммуноглобулинов
CD-маркеры (кластеры дифференцировки) представляют собой антигены клеточной мембраны, характерные для определённых линий, стадий созревания и функциональных состояний иммунокомпетентных клеток. Их выявляют с помощью моноклональных антител, меченных флуорохромами, преимущественно методом проточной цитометрии. Комбинация маркеров позволяет провести иммунофенотипирование клеток, то есть установить их принадлежность к Т-, В-, NK-клеткам, предшественникам кроветворения или активированным субпопуляциям.
Проточная цитометрия обеспечивает не только качественную идентификацию, но и количественную оценку клеток: определяется их доля среди лейкоцитов или лимфоцитов, а при использовании абсолютного подсчёта — число клеток в единице объёма крови. Так оценивают содержание CD3+ Т-лимфоцитов, CD4+ и CD8+ субпопуляций, CD19+/CD20+ В-лимфоцитов, CD16+/CD56+ NK-клеток и других популяций. Изменение соотношения и абсолютного количества этих клеток имеет значение при диагностике иммунодефицитов, гемобластозов, лимфопролиферативных заболеваний и мониторинге иммунного статуса.
CD-маркеры не измеряют непосредственно функциональную активность комплемента или фагоцитоза и не определяют концентрацию иммуноглобулинов в сыворотке. Они характеризуют клеточный состав иммунной системы и экспрессию антигенов на поверхности клеток. Поэтому правильным является применение CD-маркеров для идентификации и количественного учёта субпопуляций иммунокомпетентных клеток.
| Маркер или комбинация | Основная клеточная популяция | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| CD45 | Зрелые лейкоциты | Подтверждение принадлежности клеток к лейкоцитарному ряду; используется при построении гейтов проточной цитометрии |
| CD3 | Зрелые Т-лимфоциты | Определение общей популяции Т-клеток и оценка выраженности клеточного иммунитета |
| CD4 и CD8 | Т-хелперы и цитотоксические Т-лимфоциты | Расчёт абсолютного количества и соотношения CD4+/CD8+; оценка иммунодефицитных и лимфопролиферативных состояний |
| CD19, CD20 | В-лимфоциты | Выявление В-клеточной популяции, её дефицита или клонального расширения |
| CD16 и CD56 | NK-клетки | Идентификация естественных киллеров; оценка их относительного и абсолютного содержания |
| CD34 | Гемопоэтические стволовые и прогениторные клетки | Подсчёт клеток для оценки клеточного трансплантата и контроля восстановления кроветворения |
| CD25, HLA-DR, CD38 | Активированные лимфоциты и отдельные функциональные субпопуляции | Оценка активации иммунных клеток и уточнение иммунофенотипа при патологических процессах |
Интерпретация результатов проводится с учётом возраста, клинической ситуации, общего числа лейкоцитов и методики подсчёта. Для надёжного распознавания популяции обычно используют не один антиген, а панель взаимодополняющих CD-маркеров. При подозрении на лимфопролиферативное заболевание анализ экспрессии антигенов помогает выявить атипичный или клональный иммунофенотип. Функциональные тесты фагоцитоза, активности комплемента и количественное определение иммуноглобулинов остаются самостоятельными лабораторными исследованиями.