2) фазово-контрастный
3) бактериологический
4) иммунологический (+)
Для лабораторного подтверждения ВИЧ-инфекции применяют иммунологические методы, выявляющие специфический иммунный ответ на вирус. Основными мишенями являются антитела к антигенам ВИЧ-1/ВИЧ-2 и антиген p24. На практике сначала выполняют скрининговое исследование методом иммуноферментного или хемилюминесцентного анализа, а реактивный результат подтверждают более специфическим иммунологическим тестом — иммуноблоттингом, линейным иммуноанализом или другим тестом, предусмотренным действующим алгоритмом.
Диагностически значимым является воспроизводимое выявление маркеров ВИЧ при последовательном применении тестов с разными принципами или антигенными составами. В ранний период после инфицирования, когда антитела ещё не сформировались, возможна серонегативная фаза; в такой ситуации используют определение антигена p24 и/или нуклеиновых кислот ВИЧ методом ПЦР. Поэтому иммунологическое исследование оценивают с учётом срока предполагаемого инфицирования и при необходимости дополняют молекулярно-биологическими тестами.
Микроскопия в тёмном поле и фазово-контрастная микроскопия предназначены преимущественно для визуализации живых или мало контрастных микроорганизмов и не позволяют подтвердить ВИЧ-инфекцию. Бактериологический метод основан на выделении и идентификации бактерий в культуре, тогда как ВИЧ является вирусом и не диагностируется посевом на стандартные питательные среды. Таким образом, правильный выбор отражает иммунологическую основу серологической диагностики ВИЧ.
| Метод | Что выявляет | Основная диагностическая роль | Ограничения |
|---|---|---|---|
| Иммуноферментный или хемилюминесцентный анализ | Антитела к ВИЧ-1/ВИЧ-2 и, в тестах 4-го поколения, антиген p24 | Первичный скрининг образца крови | Возможны ложноположительные результаты; реактивный результат требует подтверждения |
| Иммуноблоттинг или линейный иммунологический анализ | Антитела к отдельным белкам ВИЧ | Подтверждение специфичности иммунного ответа | Может быть неопределённым при ранней инфекции или неполном формировании антител |
| ПЦР на нуклеиновые кислоты ВИЧ | РНК или провирусную ДНК ВИЧ | Выявление ранней инфекции и уточнение неопределённых серологических результатов | Требует специализированного оборудования и строгого контроля контаминации |
| Микроскопия в тёмном поле | Морфологические признаки отдельных тонких микроорганизмов | Прямая визуализация, например при исследовании на возбудителя сифилиса в подходящем материале | Не выявляет ВИЧ и не определяет антитела или антиген p24 |
| Фазово-контрастная микроскопия | Контраст живых, обычно неокрашенных клеток и микроорганизмов | Морфологическая оценка исследуемого материала | Не обладает специфичностью для ВИЧ-инфекции |
| Бактериологический метод | Рост и свойства бактерий в культуре | Диагностика бактериальных инфекций | ВИЧ не культивируется на стандартных бактериологических питательных средах |
Интерпретация результатов проводится не по одному изолированному показателю, а в соответствии с утверждённым алгоритмом подтверждения и клинической ситуацией. Отрицательный результат в период диагностического окна не исключает недавнее инфицирование и может потребовать повторного тестирования. При подтверждённой инфекции дальнейшее обследование включает определение вирусной нагрузки и количества CD4+-лимфоцитов для оценки прогноза и эффективности антиретровирусной терапии. Соблюдение преаналитических требований и алгоритмов подтверждения снижает риск диагностических ошибок.