2) быстро разморозить при 37?; 1 (+)
3) разморозить при комнатной температуре; 24
4) разморозить при комнатной температуре; 2
Замороженные образцы для коагулологических исследований следует быстро размораживать при температуре 37 °C, предпочтительно в термостатируемой водяной бане, и исследовать не позднее чем через 1 час после полного размораживания. Такой режим обеспечивает равномерное восстановление жидкого состояния плазмы и минимизирует период, в течение которого активность факторов свертывания может изменяться. Особенно чувствительны к нарушениям преаналитического этапа факторы V и VIII, относящиеся к лабильным компонентам гемостаза.
Медленное размораживание при комнатной температуре повышает риск частичной денатурации белков, контактной активации свертывания, образования микросгустков и получения ложно измененных результатов. Избыточный нагрев, в том числе при температуре около 40 °C, также может снижать функциональную активность факторов. После размораживания плазму аккуратно перемешивают без интенсивного встряхивания, не допускают повторного замораживания и выполняют исследование как можно скорее; задержка способна привести к ложному удлинению АЧТВ и протромбинового времени.
Соблюдение этого режима особенно важно при оценке внутреннего и общего путей свертывания, а также концентрации фибриногена. Интервал в 1 час является практическим пределом для стандартизации результатов, однако конкретные сроки могут уточняться инструкцией к анализатору и локальной стандартной операционной процедурой.
| Объект или этап | Что оценивается | Требование к обращению с образцом | Возможное искажение результата |
|---|---|---|---|
| Фактор VIII | Лабильный фактор внутреннего пути свертывания | Быстрое размораживание при 37 °C, исследование в течение 1 часа | Ложно низкая активность и удлинение АЧТВ при задержке или медленном размораживании |
| Фактор V | Лабильный фактор общего пути | Минимизация времени нахождения размороженной плазмы до анализа | Снижение активности, ложное удлинение протромбинового времени и АЧТВ |
| Протромбиновое время и МНО | Внешний и общий пути; факторы I, II, V, VII и X | Однородно размороженная плазма без видимых сгустков | Недостоверное удлинение времени свертывания при деградации факторов или микросгустках |
| АЧТВ | Внутренний и общий пути; факторы VIII, IX, XI, XII, V и X | Быстрое размораживание и аккуратное перемешивание непосредственно перед постановкой | Ложное удлинение вследствие потери лабильных факторов либо активации свертывания |
| Фибриноген по методу Клаусса | Функциональная способность фибриногена превращаться в фибрин | Исключение перегрева, повторных циклов замораживания и размораживания | Ложно сниженная или нестабильная концентрация фибриногена |
| Температурный режим | Сохранение нативной структуры белков плазмы | 37 °C; не использовать комнатную температуру для медленного размораживания и не перегревать выше установленного режима | Денатурация факторов, преципитация белков, активация коагуляции и рост аналитической вариабельности |
Качество результата определяется не только температурой размораживания, но и правильным соотношением крови и цитрата натрия, своевременным центрифугированием и отсутствием гемолиза или сгустков. Размораживание проводят однократно, а образец после полного перехода в жидкое состояние осторожно гомогенизируют. При подозрении на нарушение условий хранения или транспортировки результат следует интерпретировать с осторожностью и рассмотреть повторный забор материала.