2) цитохимический метод (+)
3) трепанобиопсия подвздошной кости
4) пунктат костного мозга
Цитохимическое исследование выявляет в бластных клетках активность ферментов и наличие внутриклеточных компонентов, характерных для определённого направления дифференцировки. Положительная реакция на миелопероксидазу или окрашивание суданом чёрным B подтверждают миелоидную природу бластов, тогда как активность неспецифических эстераз указывает на моноцитарную дифференцировку. Поэтому цитохимия позволяет разграничить основные варианты острого лейкоза и лежит в основе классической FAB-классификации.
Мазок периферической крови и пунктат костного мозга необходимы для обнаружения бластов, оценки их количества, морфологии и степени угнетения нормального кроветворения, однако одних морфологических признаков часто недостаточно для точного определения клеточной линии. Трепанобиопсия преимущественно характеризует клеточность и архитектонику костного мозга, распространённость инфильтрации и наличие фиброза. Таким образом, среди перечисленных подходов именно цитохимический метод даёт наиболее специфические признаки варианта лейкоза.
В современной диагностике цитохимические реакции применяются как часть комплексного исследования: определение линейной принадлежности дополняют многоцветной проточной цитометрией, цитогенетическими и молекулярно-генетическими тестами. Иммунофенотипирование требуется для точного распознавания миелоидных, B- и T-лимфоидных бластов, а генетические изменения во многих случаях определяют самостоятельную нозологическую форму, прогноз и лечебную тактику.
| Метод или реакция | Основной диагностический признак | Практическое значение |
|---|---|---|
| Миелопероксидаза | Цитоплазматическое окрашивание миелобластов | Подтверждает миелоидную дифференцировку; обычно отсутствует в лимфобластах |
| Судан чёрный B | Выявление липидов гранул клеток миелоидного ряда | Поддерживает диагноз острого миелоидного лейкоза |
| Неспецифическая эстераза | Диффузная или гранулярная реакция в монобластах и промоноцитах | Указывает на моноцитарный или миеломоноцитарный вариант |
| Хлорацетатэстераза | Активность преимущественно в клетках гранулоцитарного ряда | Помогает отличить гранулоцитарную дифференцировку от моноцитарной |
| PAS-реакция | Блочная или крупногранулярная PAS-позитивность | Может поддерживать лимфоидную или эритроидную дифференцировку, но не является абсолютно специфичной |
| Исследование пунктата костного мозга | Подсчёт бластов и оценка их морфологии | Подтверждает острый лейкоз и предоставляет материал для цитохимии, иммунофенотипирования и генетических исследований |
| Трепанобиопсия | Диффузная или очаговая инфильтрация, клеточность, фиброз | Особенно полезна при сухой пункции и неравномерном поражении костного мозга |
Цитохимические признаки отражают функциональную специализацию бластных клеток и позволяют быстро получить предварительное заключение о направлении их дифференцировки. Особенно диагностически значима миелопероксидаза, поскольку её обнаружение служит надёжным аргументом в пользу миелоидной линии. Вместе с тем отрицательные или неоднозначные реакции не исключают острый миелоидный лейкоз, например его минимально дифференцированный вариант. Окончательный диагноз формулируют только после сопоставления морфологии, цитохимии, иммунофенотипа и генетических характеристик опухолевого клона.