2) ацетоном рН 2-3
3) этанолом рН 7
4) ацетониртилом рН 8-8,5
Производные фенотиазина относятся к слабым органическим основаниям. В водном растворе они существуют в равновесии между протонированной катионной формой BH+ и неионизированной формой B: BH+ ⇄ B + H+. При повышении pH равновесие смещается в сторону свободного основания, обладающего большей липофильностью и способностью переходить из водной фазы в органический растворитель.
Хлороформ хорошо экстрагирует нейтральные липофильные молекулы и практически не смешивается с водой, что обеспечивает эффективное разделение фаз. Щелочная среда с pH 13 практически полностью переводит фенотиазины в неионизированное состояние, поэтому их распределение в хлороформе и степень экстракции максимальны. В кислой среде, напротив, преобладает водорастворимая катионная форма, а при pH 7 или 8–8,5 депротонирование может быть неполным.
Данный принцип используется при жидкостно-жидкостной экстракции фенотиазинов в химико-токсикологическом исследовании биологических жидкостей. Эффективность выделения определяется не только природой растворителя, но и соотношением pH среды и значения pKa конкретного соединения. Поэтому для увеличения выхода аналита выбирают щелочную реакцию среды и липофильный органический экстрагент.
| Условия среды | Преимущественная форма фенотиазина | Растворимость | Ожидаемая эффективность экстракции |
|---|---|---|---|
| pH 2–3 | Протонированная форма BH+ | Высокая в водной фазе | Низкая при экстракции органическим растворителем |
| pH около 7 | Смешанное соотношение BH+ и B | Зависит от pKa препарата | Умеренная или неполная |
| pH 8–8,5 | Возрастает доля неионизированной формы B | Растворимость в органической фазе увеличивается | Выше, чем в нейтральной среде, но может быть неполной |
| pH около 13 | Преимущественно свободное основание B | Минимальная гидратация, высокая липофильность | Максимальная |
| Хлороформ | Не влияет существенно на ионизацию, но экстрагирует нейтральную форму | Хорошая растворимость липофильных фенотиазинов | Высокая при щелочном pH |
| Ацетон или этанол | Зависит главным образом от pH и состава исходной пробы | Смешиваются с водой или недостаточно селективны для разделения фаз | Менее предпочтительны для жидкостно-жидкостной экстракции |
Таким образом, сочетание сильного подщелачивания и хлороформа обеспечивает перевод фенотиазинов в липофильную свободную форму и её концентрирование в органическом слое. Этот подход повышает аналитическую чувствительность последующих методов идентификации, включая тонкослойную хроматографию и хроматографию с детектированием. При практической работе дополнительно контролируют полноту разделения фаз, возможную эмульсию и стабильность исследуемого соединения.