2) максимально крупные фрагменты слизистой оболочки
3) биоптат, содержащий все слои тканей дыхательных путей
4) биоптат ткани альвеолярных ацинусов
Оптимальным материалом служат небольшие свежие фрагменты реснитчатого эпителия, полученные браш-биопсией. Такой забор сохраняет жизнеспособные клетки и апикальную поверхность с ресничками, поэтому их движение можно непосредственно оценить методом световой или высокоскоростной видеомикроскопии в нативной среде. В основе движения лежит работа аксонемы типа 9+2 и динеиновых ручек; при нарушении их структуры или функции выявляют снижение частоты, асинхронность, ригидность либо атипичный характер биения.
Мелкие фрагменты обеспечивают хорошую оптическую доступность ресничек и минимальное механическое повреждение, тогда как крупные кусочки слизистой часто содержат избыток слизи, многослойные наложения и участки, затрудняющие визуализацию отдельных ресничек. Полнослойный биоптат предназначен прежде всего для морфологического исследования: фиксация, транспортировка и обработка ткани обычно делают оценку жизнеспособного движения невозможной. Ткань альвеолярных ацинусов также не подходит, поскольку альвеолы выстланы пневмоцитами и не содержат реснитчатого эпителия, характерного для воздухоносных путей.
| Материал или способ получения | Что можно оценить | Диагностическая пригодность | Основное ограничение |
|---|---|---|---|
| Мелкие фрагменты реснитчатого эпителия после браш-биопсии | Частоту, координацию и характер биения ресничек в живых клетках | Предпочтительный материал для функционального исследования | Требует быстрой доставки и исследования в условиях, поддерживающих жизнеспособность клеток |
| Максимально крупные фрагменты слизистой оболочки | Обширный участок эпителия и подлежащих тканей | Менее удобны для прямой оценки движения ресничек | Наложение клеток, избыток слизи и ухудшение визуализации отдельных ресничек |
| Полнослойный биоптат дыхательных путей | Архитектуру эпителия, стромы, гладкой мускулатуры и других слоёв | Предпочтителен для гистологической оценки, а не для исследования подвижности | Фиксация и обработка ткани прекращают физиологическое движение ресничек |
| Биоптат альвеолярных ацинусов | Строение альвеол, пневмоцитов и межальвеолярных перегородок | Непригоден для оценки моторики реснитчатого эпителия | В альвеолярных отделах отсутствует типичный реснитчатый эпителий |
| Нативный материал, исследованный с задержкой | Формально может демонстрировать движение ресничек | Результат имеет ограниченную достоверность | Охлаждение, высыхание, воспалительные примеси и анестетики изменяют моторику |
| Реснички при первичной цилиарной дискинезии | Сниженное или отсутствующее биение, патологические паттерны движения | Функциональные признаки поддерживают диагноз в комплексе с другими тестами | Острый ринит, табачный дым и вторичное воспаление могут давать транзиторные нарушения |
Исследование подвижности ресничек является функциональным тестом и не заменяет электронную микроскопию, генетическое исследование или оценку назального оксида азота при подозрении на первичную цилиарную дискинезию. Для повышения воспроизводимости необходимо анализировать несколько клеточных фрагментов и фиксировать температуру, состав среды и время от забора до исследования. При выраженном воспалении или инфекции результат целесообразно интерпретировать осторожно и при необходимости подтверждать повторным исследованием после санации дыхательных путей.