2) 0,5 мл (+)
3) 5-6 капель
4) 1,0 мл
При бактериологическом исследовании ликвора в среду обогащения в стандартной учебно-методической схеме вносят 0,5 мл материала. Ликвор в норме стерилен, а при бактериальном менингите количество возбудителя может быть небольшим, особенно после начала антибиотикотерапии. Поэтому посев на жидкую среду обогащения необходим для размножения микроорганизмов до концентрации, достаточной для последующей идентификации.
Объем 0,5 мл представляет собой компромисс между аналитической чувствительностью и сохранением репрезентативности пробы. Меньшее количество может привести к снижению вероятности обнаружения возбудителя при малой микробной нагрузке, тогда как чрезмерный объем не является преимуществом и должен соответствовать установленному соотношению материала и питательной среды. Инокуляцию выполняют в асептических условиях как можно быстрее после забора, поскольку задержка, охлаждение или предшествующее лечение способны уменьшить жизнеспособность микроорганизмов.
Посев в среду обогащения не заменяет прямую микроскопию, посев на плотные питательные среды и молекулярные методы. Результат оценивают в совокупности с цитологическими показателями ликвора, прежде всего плеоцитозом, преобладанием нейтрофилов, повышением концентрации белка и снижением содержания глюкозы, характерными для бактериального воспаления.
| Этап исследования | Материал или метод | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Первичная оценка | Цвет, прозрачность, цитоз, формула клеток | Позволяет выявить воспалительный синдром и ориентировочно отличить бактериальный процесс от вирусного или неинфекционного. |
| Микроскопия | Окраска осадка, в том числе по Граму | Дает возможность быстро предположить морфологическую группу возбудителя, но отрицательный результат не исключает инфекции при низкой концентрации бактерий или после антибиотиков. |
| Обогащение | Внесение 0,5 мл ликвора в жидкую питательную среду | Создает условия для накопления малочисленных и требовательных микроорганизмов, повышая вероятность последующего выделения культуры. |
| Выделение культуры | Пересев на плотные селективные и дифференциально-диагностические среды | Формирование колоний позволяет провести видовую идентификацию и оценить культуральные свойства изолята. |
| Идентификация | Биохимические, масс-спектрометрические или иммунологические тесты | Уточняет вид возбудителя, что необходимо для выбора направленной этиотропной терапии. |
| Определение чувствительности | Антибиотикограмма или автоматизированное тестирование | Выявляет устойчивость микроорганизма и позволяет скорректировать эмпирическое лечение с учетом локальных данных резистентности. |
| Молекулярная диагностика | ПЦР или мультиплексное выявление генетического материала | Особенно полезна при отрицательном посеве, малом количестве возбудителя или предварительной антибактериальной терапии; обнаруживает ДНК или РНК, но не всегда подтверждает жизнеспособность микроорганизма. |
Правильный объем инокулята имеет значение прежде всего при низкой концентрации бактерий в клиническом образце. Преаналитические ошибки, включая недостаточный объем ликвора, нарушение стерильности и позднюю доставку, могут привести к ложноотрицательному результату. При использовании автоматизированных систем или специальных транспортных флаконов объем и порядок внесения определяются инструкцией производителя и локальным стандартом лаборатории.