2) активность фермента по отношению к субстрату
3) количество фермента, катализирующее образование 1 моль продукта в секунду при стандартных условиях
4) количество фермента, вызывающее превращение 1 мкмоль субстрата в минуту при стандартных условиях (+)
Международная единица ферментативной активности (U, или IU) — это количество фермента, которое в заданных стандартных условиях катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в минуту. В аналитической практике активность определяют по скорости образования продукта или уменьшения концентрации субстрата, обычно с использованием спектрофотометрического, флуориметрического либо кинетического метода.
Принципиально важно, что ферментативная активность характеризует не массу белка как таковую, а его каталитическую способность. Результат зависит от температуры, pH, ионной силы, концентрации субстрата и кофакторов, поэтому условия реакции должны быть строго регламентированы. Активность фермента в биологической жидкости обычно выражают в U/л; это позволяет оценивать интенсивность ферментативного процесса, например при повреждении клеток или нарушении функции органов.
Показатель активности на единицу массы белка называется удельной активностью и используется преимущественно для характеристики степени очистки ферментного препарата. Международную единицу не следует смешивать с каталом: катализатором в системе SI является количество фермента, обеспечивающее превращение 1 моль субстрата в секунду. Таким образом, правильное определение основано на скорости реакции, выраженной в микромолях в минуту при фиксированных условиях.
| Показатель | Определение | Практическое значение |
|---|---|---|
| Международная единица, U или IU | Превращение 1 мкмоль субстрата в минуту при регламентированных условиях | Основная единица ферментативной активности в клинической лабораторной диагностике |
| Активность фермента | Скорость образования продукта или расходования субстрата | Отражает функциональную каталитическую способность фермента в конкретной реакции |
| Удельная активность | Ферментативная активность, отнесённая к 1 мг общего белка, обычно в U/мг | Оценивает чистоту ферментного препарата и степень его обогащения |
| Катал, kat | Количество каталитической активности, обеспечивающее превращение 1 моль субстрата в секунду | Единица SI; 1 kat равен 60 000 000 U |
| Активность в сыворотке или плазме | Количество единиц ферментативной активности в 1 л биологического материала, U/л | Используется для диагностики повреждения тканей и оценки функции органов |
| Условия измерения | Температура, pH, концентрации субстрата, кофакторов и активаторов или ингибиторов | Обеспечивают сопоставимость результатов и их корректную интерпретацию |
Ферментативная активность является кинетическим показателем и не тождественна концентрации ферментного белка. При лабораторном анализе оценивают начальный линейный участок реакции, где скорость пропорциональна количеству активного фермента. Изменение активности в сыворотке интерпретируют с учётом референсных интервалов, метода исследования и клинической ситуации. Единообразное выражение результатов необходимо для сравнения данных, полученных в разных лабораториях.