2) миелопероксидазу
3) гликоген (+)
4) судан черный
Для острого лимфобластного лейкоза характерна положительная реакция на гликоген, обычно выявляемая в составе PAS-реакции. В лимфобластах гликоген накапливается в значительном количестве и окрашивается в виде крупных, плотных, нередко глыбчатых гранул (block positivity ). Такой тип цитохимической реакции отражает особенности метаболизма незрелых лимфоидных клеток и является классическим диагностическим признаком лимфобластного варианта острого лейкоза.
Миелопероксидаза и судан чёрный выявляют компоненты гранул миелоидных клеток, поэтому при остром лимфобластном лейкозе обычно отрицательны. Неспецифическая эстераза может быть отрицательной или давать слабую очаговую реакцию, тогда как выраженная диффузная реакция более характерна для моноцитарной дифференцировки. В современной диагностике цитохимия имеет вспомогательное значение: принадлежность бластов к лимфоидной линии подтверждают проточной цитометрией с оценкой TdT, CD34, CD19, CD79a, CD10, CD3 и других маркеров, а также цитогенетическими и молекулярными исследованиями.
| Исследуемый признак | Острый лимфобластный лейкоз | Миелоидные или моноцитарные бласты | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Гликоген, PAS-реакция | Чаще положительная, крупные глыбчатые гранулы или блоки окрашивания | При миелоидной дифференцировке обычно отрицательная либо менее характерная | Классический цитохимический признак лимфобластов |
| Миелопероксидаза | Отрицательная | Положительная у большинства миелобластов | Подтверждает миелоидную, а не лимфоидную направленность дифференцировки |
| Судан чёрный B | Обычно отрицательная | Положительная в миелоидных гранулах | Дополнительный маркер миелоидного происхождения бластов |
| Неспецифическая эстераза | Отрицательная или слабая очаговая реакция | Диффузно положительная при моноцитарной дифференцировке | Помогает распознавать острые монобластные и миеломоноцитарные варианты |
| Терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза (TdT) | Часто положительная в незрелых лимфобластах | Обычно отрицательная, за исключением отдельных незрелых миелоидных форм | Иммунофенотипический признак лимфоидной незрелости |
| Линейные антигены | B-линия: CD19, CD79a, CD10; T-линия: цитоплазматический или поверхностный CD3 | CD13, CD33, CD117, MPO и другие миелоидные маркеры | Основной современный способ подтверждения клеточной линии |
Положительная PAS-реакция на гликоген особенно полезна при первичном цитохимическом разграничении лимфобластных и миелоидных лейкозов. Наиболее типичен не просто факт окрашивания, а крупноглыбчатый характер распределения гликогена в цитоплазме. Отрицательные реакции на миелопероксидазу и судан чёрный поддерживают лимфоидную природу бластов, но сами по себе не исключают редкие варианты смешанного фенотипа. Окончательная классификация острого лейкоза проводится по совокупности морфологических, иммунологических, цитогенетических и молекулярных данных.