2) является кровь цельная, без консерванта
3) является кровь с ЭДТА
4) является кровь с цитратом
Сухие пятна капиллярной крови на специальной фильтровальной бумаге являются стандартным материалом для массового неонатального скрининга на муковисцидоз. В образце определяют концентрацию иммунореактивного трипсиногена — панкреатического профермента, уровень которого у новорождённых с муковисцидозом часто повышается вследствие обструкции выводных протоков поджелудочной железы и повреждения ацинарных клеток. Забор нескольких капель крови из пятки позволяет одновременно проводить скрининг на несколько наследственных заболеваний.
Высушивание крови стабилизирует исследуемые аналиты, снижает риск протекания и биологического загрязнения, упрощает маркировку, транспортировку и длительное хранение материала. Цельная венозная кровь без консерванта либо образцы с ЭДТА или цитратом требуют специальных пробирок, соблюдения температурного режима и ограниченных сроков доставки, поэтому для централизованных массовых скрининговых программ они менее пригодны. Кроме того, антикоагулянты изменяют соотношение плазмы и клеточных компонентов и могут влиять на результаты методов, валидированных именно для сухих пятен крови.
Повышенный иммунореактивный трипсиноген не является окончательным подтверждением муковисцидоза: возможны транзиторное повышение у недоношенных, перинатальный стресс и другие состояния. При положительном скрининговом результате выполняют предусмотренный программой второй этап — повторное определение маркера и/или молекулярно-генетическое исследование гена CFTR. Диагноз подтверждают исследованием хлоридов пота в сочетании с клиническими и генетическими данными.
| Этап или метод | Материал | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Первичный неонатальный скрининг | Сухое пятно капиллярной крови | Количественное определение иммунореактивного трипсиногена; выявление новорождённых группы риска |
| Повторный скрининговый тест | Новое сухое пятно крови | Оценка сохраняющегося повышения иммунореактивного трипсиногена и снижение числа ложноположительных результатов |
| Молекулярно-генетическое исследование | ДНК, выделенная из сухого пятна крови или другого валидированного образца | Обнаружение патогенных вариантов гена CFTR; результат оценивают с учётом состава применяемой панели |
| Потовая проба | Пот, полученный методом пилокарпинового ионофореза | Определение концентрации хлоридов; основной метод лабораторного подтверждения нарушения функции CFTR |
| Цельная кровь с ЭДТА | Венозная кровь в пробирке с антикоагулянтом | Может применяться для отдельных генетических исследований, но не является стандартным первичным материалом массового скрининга |
| Кровь с цитратом | Венозная кровь с цитратом натрия | Предназначена преимущественно для исследования гемостаза; для скрининга на муковисцидоз не используется |
Качество скрининга зависит от полного пропитывания фильтровальной бумаги кровью, естественного высушивания образца и правильной идентификации новорождённого. Недостаточный объём, наслаивание капель, загрязнение или воздействие влаги могут привести к недостоверному результату и необходимости повторного забора. Положительный скрининговый тест указывает на повышенный риск заболевания, но не заменяет подтверждающую диагностику. Раннее выявление муковисцидоза позволяет своевременно начать нутритивную поддержку, заместительную терапию панкреатическими ферментами и наблюдение в специализированном центре.