2) микроэлементы
3) гормоны
4) ДНК (+)
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) предназначена для выявления определённой последовательности нуклеиновой кислоты, прежде всего ДНК. В реакции участвуют праймеры, комплементарные участку-мишени, термостабильная ДНК-полимераза, нуклеотиды и повторяющиеся циклы денатурации, отжига праймеров и элонгации. В результате специфический фрагмент ДНК многократно амплифицируется, что позволяет обнаружить даже небольшое количество генетического материала.
ПЦР применяют для диагностики инфекций, выявления наследственных мутаций, генетического типирования и определения опухолевых молекулярных маркеров. В режиме реального времени оценивают накопление ампликона по флуоресценции; пороговый цикл (Ct) обратно связан с исходной концентрацией мишени при корректной постановке анализа. Для исследования РНК используют предварительную обратную транскрипцию с получением комплементарной ДНК, поэтому в данном тестовом контексте правильным объектом является ДНК.
| Исследуемый объект | Молекулярная природа | Основные методы определения | Типичный диагностический результат |
|---|---|---|---|
| ДНК | Нуклеиновая кислота, содержащая генетическую информацию | ПЦР, ПЦР в реальном времени, секвенирование | Наличие или отсутствие специфической последовательности, мутации либо возбудителя |
| РНК | Нуклеиновая кислота, часто являющаяся геномом РНК-вирусов или матрицей экспрессии генов | ОТ-ПЦР, количественная ОТ-ПЦР | Выявление РНК после обратной транскрипции в комплементарную ДНК |
| Гормоны | Белковые, пептидные или стероидные регуляторные молекулы | Иммунохемилюминесцентный анализ, ИФА, масс-спектрометрия | Концентрация гормона в биологическом материале |
| Гликолипиды | Липиды, содержащие углеводный компонент | Хроматография, масс-спектрометрия, биохимические методы | Содержание или профиль отдельных липидных фракций |
| Микроэлементы | Химические элементы, необходимые организму в следовых количествах | Атомно-абсорбционная спектрометрия, ICP-MS, ICP-OES | Концентрация элемента в крови, моче или тканях |
| Антитела | Иммуноглобулиновые белки, специфичные к антигену | ИФА, иммуноблоттинг, иммунохемилюминесцентные методы | Серологический признак иммунного ответа или контакта с антигеном |
Положительный результат ПЦР означает обнаружение целевой последовательности выше аналитического порога метода и оценивается с учётом качества образца, отрицательного и положительного контролей. Отрицательный результат не исключает инфекцию или генетическое изменение при недостаточном количестве материала, нарушении транспортировки либо наличии ингибиторов амплификации. Поэтому молекулярное заключение интерпретируют вместе с клиническими данными и результатами других лабораторных исследований.