2) сыворотке крови
3) богатой тромбоцитами плазме
4) бедной тромбоцитами плазме (+)
Рутинные коагулологические исследования выполняют в бедной тромбоцитами плазме, полученной из венозной крови, стабилизированной цитратом натрия. При центрифугировании форменные элементы удаляются, а концентрация тромбоцитов в исследуемом образце должна быть минимальной, поскольку их фосфолипидная поверхность и выделяемые факторы способны существенно влиять на время свертывания. Для большинства тестов используют плазму с содержанием тромбоцитов менее 10 × 109/л.
В рутинной коагулограмме исследуют протромбиновое время с расчетом МНО, активированное частичное тромбопластиновое время, концентрацию фибриногена, тромбиновое время и ряд других показателей именно в цитратной плазме. Цитрат связывает ионизированный кальций, временно блокируя свертывание; на аналитическом этапе кальций добавляют вновь, что позволяет стандартизировать реакцию. Удаление тромбоцитов обеспечивает оценку плазменных факторов свертывания и контролируемого количества реагентных фосфолипидов.
Сыворотка для этих целей непригодна, так как образуется после свертывания крови и уже не содержит фибриноген, а часть факторов свертывания расходуется или активируется. Богатая тромбоцитами плазма сохраняет значительное количество клеточных элементов и может давать вариабельные результаты за счет тромбоцитарных фосфолипидов, микрочастиц и факторов, высвобождаемых при активации тромбоцитов. Свободная от тромбоцитов плазма с практически полным их удалением необходима для отдельных специальных исследований, но стандартным материалом рутинной коагулограммы является именно бедная тромбоцитами плазма.
| Биологический материал | Основная характеристика | Применение и влияние на результат |
|---|---|---|
| Бедная тромбоцитами плазма | Цитратная плазма с минимальным содержанием тромбоцитов | Стандартный материал для протромбинового времени, МНО, АЧТВ, фибриногена и тромбинового времени |
| Свободная от тромбоцитов плазма | Плазма с практически полным удалением тромбоцитов | Используется преимущественно в специальных исследованиях, например при оценке фосфолипидзависимых антител и микрочастиц |
| Богатая тромбоцитами плазма | Содержит высокую концентрацию тромбоцитов | Применяется для исследований функции тромбоцитов; не подходит для стандартизованной оценки плазменного гемостаза |
| Сыворотка | Жидкая часть крови после образования и ретракции сгустка | Не содержит фибриногена и имеет измененный состав факторов свертывания; для рутинной коагулограммы непригодна |
| Цитратная цельная кровь | Содержит плазму и форменные элементы, включая тромбоциты | Может применяться в отдельных цельнокровных или экспресс-тестах, но не является стандартом для большинства плазменных коагулологических тестов |
| Гепаринизированная плазма | Содержит антикоагулянт, активирующий антитромбин | Неприемлема для большинства тестов рутинной коагулограммы, поскольку гепарин искажает оценку свертывания |
Корректность результата зависит не только от вида плазмы, но и от соблюдения соотношения крови и цитрата, своевременного центрифугирования и исключения гемолиза. Недостаточное удаление тромбоцитов особенно значимо при исследовании фосфолипидзависимых реакций и может приводить к ложной вариабельности показателей. Поэтому выбор бедной тромбоцитами плазмы является частью стандартизации преаналитического этапа коагулологических исследований.