2) иммунофенотипирования лимфоцитов (+)
3) исследования концентрации медиаторов воспаления
4) оценки концентрации иммуноглобулинов
Проточная цитометрия в клинико-диагностической лаборатории преимущественно применяется для иммунофенотипирования клеток, то есть определения набора поверхностных и внутриклеточных антигенов с помощью флуорохром-меченых моноклональных антител. Исследуемые клетки находятся в суспензии и поочерёдно проходят через лазерный пучок; прибор регистрирует прямое и боковое светорассеяние, а также интенсивность флуоресценции. Это позволяет одновременно оценивать несколько параметров одной клетки и количественно характеризовать клеточные популяции.
При исследовании лимфоцитов устанавливают их принадлежность к основным субпопуляциям и оценивают их соотношение: Т-клетки идентифицируют по CD3, В-клетки — по CD19 или CD20, NK-клетки — по CD16/CD56. Дополнительно определяют субпопуляции CD4+ и CD8+, активированные, регуляторные и другие функционально значимые клеточные группы. Результаты могут быть представлены в процентах и абсолютном количестве клеток, что важно при диагностике иммунодефицитов, лимфопролиферативных заболеваний, лейкозов и мониторинге иммунного статуса.
Концентрации растворимых цитокинов и медиаторов воспаления обычно измеряют иммуноферментным анализом, хемилюминесцентными методами или мультиплексными тест-системами. Иммуноглобулины в сыворотке чаще определяют нефелометрически или турбидиметрически. Проточная цитометрия может использоваться для внутриклеточного выявления цитокинов или анализа антитело-связывающих микросфер, однако это специализированные приложения, а не её основное рутинное назначение.
| Клеточная популяция или признак | Основные маркеры | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Все зрелые Т-лимфоциты | CD3+ | Определение общей Т-клеточной популяции |
| Т-хелперы | CD3+CD4+ | Оценка клеточного иммунитета, в том числе при ВИЧ-инфекции |
| Цитотоксические Т-лимфоциты | CD3+CD8+ | Характеристика эффекторного звена клеточного иммунитета |
| В-лимфоциты | CD19+, CD20+ | Оценка гуморального иммунитета и выявление В-клеточных неоплазий |
| NK-клетки | CD3−CD16+/CD56+ | Определение клеток врождённой цитотоксичности |
| Активированные лимфоциты | HLA-DR, CD38, CD25 и другие маркеры | Оценка активации иммунного ответа и мониторинг отдельных заболеваний |
Ключевой результат иммунофенотипирования — количественная и качественная характеристика клеточных популяций по антигенному профилю. Изменение экспрессии маркеров, появление атипичного сочетания антигенов или нарушение соотношения субпопуляций помогает отличать реактивные процессы от клональных. При подозрении на гемобластоз проточная цитометрия также позволяет выявлять минимальную остаточную болезнь. Интерпретация данных проводится с учётом возраста, клинической картины, абсолютного числа лейкоцитов и референсных интервалов лаборатории.