2) хронического эксперимента (+)
3) изучения отдаленных эффектов
4) подострого эксперимента
Максимальную недействующую дозу устанавливают в хроническом эксперименте, поскольку именно он моделирует длительное или многократное поступление вещества в организм. На этом этапе используют несколько дозовых уровней и длительное наблюдение, оценивая общее состояние, массу тела, функциональные показатели, биохимические и гематологические параметры, а также морфологию органов. Максимально недействующей считают наибольшую дозу, при которой по сравнению с контрольной группой не выявляются вредные, статистически и биологически значимые изменения.
Принципиальное значение имеет оценка не только немедленной токсичности, но и кумуляции, постепенного формирования функциональных нарушений и хронического действия на органы-мишени. Полученная величина соответствует уровню, близкому к NOAEL (no observed adverse effect level — уровень, при котором неблагоприятный эффект не наблюдается), и используется как основа для установления предельно допустимых концентраций и других гигиенических нормативов с применением коэффициентов запаса.
Острый опыт предназначен преимущественно для определения выраженности непосредственного токсического действия и летальных доз, а подострый — для предварительной оценки кумулятивных и органотропных эффектов. Изучение отдалённых последствий проводят для выявления канцерогенного, мутагенного, эмбриотоксического, тератогенного и других специальных видов действия; оно не заменяет установление порога хронической токсичности.
| Этап исследования | Характер воздействия | Основные оцениваемые показатели | Практический результат |
|---|---|---|---|
| Острый опыт | Однократное или кратковременное воздействие | Клинические признаки интоксикации, летальность, LD50, выраженность непосредственного токсического эффекта | Характеристика острой токсичности и ориентировочный выбор доз для последующих исследований |
| Подострый эксперимент | Повторное воздействие в течение ограниченного периода | Кумуляция, ранние функциональные и биохимические изменения, поражение органов-мишеней | Выявление предварительных пороговых уровней и уточнение диапазона доз |
| Хронический эксперимент | Длительное повторное воздействие в условиях, приближенных к реальным | Состояние органов и систем, динамика массы тела, гематология, биохимия, морфология, адаптационные и патологические реакции | Установление максимальной недействующей дозы и порога хронического действия |
| Максимально недействующая доза | Наибольшая доза без неблагоприятных изменений относительно контроля | Отсутствие стойких, дозозависимых и биологически значимых нарушений | Исходная величина для обоснования гигиенического норматива и коэффициента запаса |
| Исследование канцерогенности | Длительное наблюдение с оценкой опухолевого процесса | Частота, латентный период и спектр новообразований | Выявление канцерогенного риска, который может реализоваться при дозах без общей токсичности |
| Исследование отдалённых эффектов | Оценка последствий воздействия после прекращения экспозиции или на последующие поколения | Мутагенность, репродуктивная токсичность, эмбрио- и фетотоксичность, тератогенность | Характеристика специальных видов опасности вещества |
Таким образом, хронический эксперимент позволяет определить безопасную границу длительного воздействия с учётом накопления и позднего развития нарушений. При интерпретации результатов учитывают дозозависимость, воспроизводимость изменений, их обратимость и биологическую значимость. Выявление специального отдалённого эффекта требует отдельной оценки риска даже в тех случаях, когда общая хроническая токсичность не обнаружена.