2) 5
3) 3
4) 2 (+)
Санитарно-вирусологический контроль воды в классической схеме состоит из двух основных этапов: концентрирования вирусов из исследуемой пробы и их последующей индикации с подтверждением видовой или групповой принадлежности. Отбор и транспортировка проб, а также подготовка материала относятся к преаналитическим процедурам и не выделяются в самостоятельный этап данной схемы.
Концентрирование необходимо из-за обычно низкой концентрации вирусных частиц в воде. Для этого применяют адсорбционно-элюционные методы, мембранную фильтрацию, ультрафильтрацию, флокуляцию или осаждение в зависимости от вида воды и утверждённой методики. Получение концентрата повышает вероятность обнаружения возбудителя и снижает риск ложноотрицательного результата при непосредственном исследовании большого объёма воды.
На втором этапе проводят индикацию вирусов в концентрате. Она может выполняться методом культивирования на чувствительных клеточных культурах с регистрацией цитопатического эффекта, а также методами ПЦР или ОТ-ПЦР, выявляющими специфические участки генома. При необходимости положительный результат подтверждают иммунологическими или молекулярно-генетическими методами; при этом обнаружение нуклеиновой кислоты не всегда свидетельствует о наличии жизнеспособного инфекционного вируса.
| Элемент исследования | Основное содержание | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Преаналитический этап | Отбор, маркировка, хранение и транспортировка пробы с соблюдением сроков и температурного режима | Предотвращает инактивацию вирусов, контаминацию и искажение результата; самостоятельным этапом схемы не считается |
| I этап — концентрирование | Извлечение вирусных частиц из значительного объёма воды и получение концентрата | Повышает аналитическую чувствительность исследования при низкой вирусной нагрузке |
| Методы концентрирования | Адсорбция с последующей элюцией, мембранная или ультрафильтрационная обработка, флокуляция, осаждение | Выбор метода зависит от типа воды, предполагаемого вируса и утверждённого протокола |
| II этап — индикация | Выявление вирусного агента в концентрате методом культивирования, ПЦР, ОТ-ПЦР или иммунологического анализа | Устанавливает факт присутствия вируса либо его генетического материала |
| Подтверждение и идентификация | Определение групповой или видовой принадлежности, уточнение генотипа при необходимости | Позволяет отличить целевой возбудитель от неспецифической реакции и оценить эпидемиологическую значимость находки |
| Контроль достоверности | Использование отрицательных и положительных контролей, контроля эффективности экстракции и ингибирования реакции | Снижает вероятность ложноположительных и ложноотрицательных результатов |
Таким образом, правильное число отражает два укрупнённых аналитических блока, а не количество отдельных лабораторных операций. Качество первого этапа непосредственно определяет чувствительность последующей индикации. Результаты интерпретируют с учётом метода выявления: культуральное исследование указывает на инфекционно активный вирус, тогда как ПЦР фиксирует наличие его генетического материала. Санитарное значение исследования состоит в оценке вирусологической безопасности воды и эффективности процессов водоподготовки.