2) ПЦР
3) УЗИ
4) метод кариотипирования (+)
Кариотипирование является основным цитогенетическим методом диагностики анеуплоидий половых хромосом — изменений их числа, возникающих преимущественно вследствие нерасхождения хромосом при мейозе или митозе. Метод основан на микроскопическом исследовании хромосом в метафазе клеточного деления с оценкой их количества, размеров, формы и принадлежности к X- или Y-хромосомам. Диагностическими являются, например, кариотипы 45,X при синдроме Шерешевского–Тернера, 47,XXY при синдроме Клайнфельтера, 47,XXX и 47,XYY.
В пренатальной диагностике исследуют клетки хориона или амниотической жидкости, а в неонатальном периоде — обычно лимфоциты периферической крови. Результат позволяет установить не только полную анеуплоидию, но и мозаицизм, при котором в организме сосуществуют клеточные линии с различными кариотипами, например 45,X/46,XX. При подозрении на низкий уровень мозаицизма может потребоваться анализ увеличенного числа метафаз или исследование нескольких тканей.
Ультразвуковое исследование и биохимический скрининг выявляют лишь косвенные признаки или оценивают риск хромосомной патологии, но не определяют набор половых хромосом. ПЦР и быстрые молекулярно-цитогенетические методы, включая QF-PCR и FISH, могут использоваться для ускоренного выявления наиболее частых анеуплоидий, однако имеют ограниченную область анализа. Поэтому при необходимости окончательной оценки числа половых хромосом и выявления мозаичных или сочетанных хромосомных нарушений предпочтительным является кариотипирование.
| Состояние | Кариотип | Цитогенетический признак | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Нормальный женский набор | 46,XX | Две X-хромосомы, общее число хромосом — 46 | Референтный женский кариотип |
| Нормальный мужской набор | 46,XY | Одна X- и одна Y-хромосома | Референтный мужской кариотип |
| Синдром Шерешевского–Тернера | 45,X | Моносомия по X-хромосоме | Выявление единственной половой хромосомы; возможны низкорослость и дисгенезия гонад |
| Синдром Клайнфельтера | 47,XXY | Дополнительная X-хромосома у лица с Y-хромосомой | Мужской фенотип, гипогонадизм, нарушение сперматогенеза |
| Трисомия X | 47,XXX | Три X-хромосомы | Женский фенотип; проявления варьируют от минимальных до нарушений развития |
| Синдром 47,XYY | 47,XYY | Дополнительная Y-хромосома | Мужской фенотип; возможны особенности роста, речи и нейроразвития |
| Мозаицизм | 45,X/46,XX; 46,XY/47,XXY и другие варианты | Две или более клеточные линии с разным набором хромосом | Выраженность клинических проявлений зависит от доли и распределения аномальной клеточной линии |
Кариотипирование относится к диагностическим, а не скрининговым исследованиям и позволяет подтвердить хромосомную аномалию в исследуемом биологическом материале. Интерпретация результата должна учитывать клинические данные, срок беременности, вид материала и вероятность мозаицизма. При выявлении структурных перестроек или неопределённого результата кариотип может быть дополнен FISH, хромосомным микроматричным анализом или молекулярно-генетическим исследованием. Для быстрой оценки частых анеуплоидий молекулярные тесты полезны как дополнение, но не заменяют полноценный цитогенетический анализ во всех клинических ситуациях.