2) кислой фосфатазы
3) лейцинаминопептидазы
4) глюкуронилтрансферазы (+)
В гепатоцитах неконъюгированный билирубин, образующийся преимущественно при распаде гемоглобина, поступает из крови в клетку в комплексе с альбумином, затем связывается с внутриклеточными белками. Его конъюгацию катализирует микросомальная UDP-глюкуронозилтрансфераза 1A1 (UGT1A1), присоединяющая к молекуле билирубина остатки глюкуроновой кислоты. Основным продуктом реакции является билирубиндиглюкуронид, в меньшей степени образуется моноглюкуронид.
После глюкуронирования билирубин становится водорастворимым и транспортируется через канальцевую мембрану гепатоцита в желчь, а затем поступает в кишечник. Именно конъюгированный билирубин преимущественно определяется лабораторно как прямая фракция. Нарушение активности UGT1A1 приводит к накоплению непрямого билирубина, тогда как дефекты канальцевой экскреции или холестаз сопровождаются повышением прямой фракции.
Нуклеотидазы, кислая фосфатаза и лейцинаминопептидаза могут использоваться как маркеры повреждения или особенностей клеточных мембран и желчных путей, но не осуществляют присоединение глюкуроновой кислоты к билирубину. Поэтому ферментативной основой образования связанного билирубина является именно активность глюкуронилтрансферазы.
| Признак | Неконъюгированный билирубин | Конъюгированный билирубин |
|---|---|---|
| Химическое состояние | Не связан с глюкуроновой кислотой | Связан с одной или двумя молекулами глюкуроновой кислоты |
| Растворимость в воде | Низкая; транспортируется в комплексе с альбумином | Высокая; циркулирует преимущественно в свободной форме |
| Основное место образования или превращения | Образуется при распаде гема в клетках ретикулоэндотелиальной системы | Образуется в гепатоцитах под действием UGT1A1 |
| Выведение почками | Не фильтруется в значимом количестве, поэтому в моче отсутствует | Фильтруется и вызывает билирубинурию при повышении концентрации в крови |
| Типичные причины повышения | Гемолиз, синдром Жильбера, синдром Криглера—Найяра | Холестаз, механическая желтуха, гепатоцеллюлярное поражение, синдромы Дабина—Джонсона и Ротора |
| Лабораторная характеристика | Преимущественное увеличение непрямой фракции; реакция Ван den Bergh замедленная | Преимущественное увеличение прямой фракции; реакция Ван den Bergh быстрая |
Активность UGT1A1 является ключевым этапом физиологической детоксикации билирубина в печени. При выраженном дефиците фермента возможно развитие тяжелой неконъюгированной гипербилирубинемии с риском билирубиновой энцефалопатии. Определение соотношения прямой и непрямой фракций помогает локализовать нарушение: до конъюгации билирубина, на уровне гепатоцита или в системе желчеоттока. В клинической практике этот показатель оценивают вместе с активностью аминотрансфераз, щелочной фосфатазы, ГГТ и данными визуализации желчных путей.