2) электрофореза белков мочи (+)
3) реакции преципитации
4) ультрацентрифугирования белков мочи
Белок Бенс—Джонса представляет собой моноклональные свободные лёгкие цепи иммуноглобулинов типа κ или λ, синтезируемые патологическим клоном плазматических клеток. Благодаря небольшой молекулярной массе они проходят через клубочковый фильтр и выделяются с мочой; наиболее часто обнаруживаются при множественной миеломе, моноклональной гаммапатии и AL-амилоидозе.
При электрофорезе белков мочи компоненты разделяются по заряду и электрофоретической подвижности. Моноклональные лёгкие цепи формируют узкую дискретную полосу или пик, то есть М-компонент, в отличие от диффузного распределения поликлональных иммуноглобулинов. Для подтверждения моноклональности и определения типа цепи применяют иммунофиксацию мочи; электрофорез является обоснованным методом первичного выявления патологического белка.
Диализ и ультрацентрифугирование разделяют вещества преимущественно по размеру, массе или скорости седиментации, но не позволяют надёжно установить иммунологическую природу белка. Реакции преципитации имеют историческое значение и могут быть неспецифичными, зависеть от концентрации белка и условий проведения. Кроме того, стандартные тест-полоски для мочи преимущественно реагируют с альбумином и способны пропустить лёгкие цепи, поэтому отрицательный результат такого скрининга не исключает протеинурию Бенс—Джонса.
| Метод | Основной принцип | Диагностическая ценность при подозрении на белок Бенс—Джонса |
|---|---|---|
| Электрофорез белков мочи | Разделение белков по заряду и подвижности в электрическом поле | Выявляет узкую моноклональную полосу или пик; оптимальный метод первичного обнаружения М-компонента в моче |
| Иммунофиксация мочи | Осаждение белка специфическими антителами к цепям κ, λ и тяжёлым цепям | Подтверждает моноклональность и определяет иммунологический тип лёгкой цепи; чувствительнее обычного электрофореза |
| Определение свободных лёгких цепей в сыворотке | Иммунохимическое количественное измерение κ и λ с расчётом их соотношения | Дополняет исследование мочи, особенно при низкой экскреции белка или олигосекреторной миеломе |
| Реакции преципитации | Образование осадка при изменении температуры или добавлении осаждающего реагента | Могут дать ориентировочный результат, но обладают меньшей специфичностью и чувствительностью |
| Диализ | Разделение молекул через полупроницаемую мембрану по размеру | Не идентифицирует моноклональные иммуноглобулиновые цепи и не является диагностическим методом их определения |
| Ультрацентрифугирование | Разделение частиц по коэффициенту седиментации в центробежном поле | Может характеризовать физические свойства белка, но не подтверждает его моноклональное происхождение |
Выявление белка Бенс—Джонса требует интерпретации результата вместе с данными общего анализа мочи, оценкой функции почек и исследованием парапротеинов в сыворотке. При подозрении на плазмоклеточное заболевание отрицательный электрофорез не исключает патологию, особенно при небольшой концентрации свободных лёгких цепей. Наиболее информативен комплекс электрофореза, иммунофиксации и определения свободных лёгких цепей с оценкой соотношения κ/λ. Обнаружение моноклонального белка является основанием для дальнейшего обследования на множественную миелому и другие моноклональные гаммапатии.