2) пуповинная кровь
3) сыворотка крови
4) кровь, высушенная на фильтровальной бумаге (+)
Для неонатального скрининга используют капиллярную цельную кровь, нанесённую на специальную фильтровальную карточку и высушенную при комнатной температуре. Материал обычно получают из прокола пятки в сроки, установленные программой скрининга, предпочтительно после начала кормления. После высушивания образуется стандартный сухой пятновой образец крови (dried blood spot, DBS), из которого лаборатория может элюировать аналиты и выполнять иммунные, ферментативные, флуориметрические, тандемно-масс-спектрометрические и молекулярно-генетические исследования.
Такой способ выбран благодаря минимальному объёму образца, простоте забора, возможности транспортировки без немедленного центрифугирования и поддержания холодовой цепи, а также высокой технологической стандартизации. В DBS определяют, в частности, тиреотропный гормон, 17-гидроксипрогестерон, фенилаланин, аминокислоты, ацилкарнитины, активность биотинидазы и другие маркеры наследственных и врождённых заболеваний. Высушивание ограничивает активность микроорганизмов и ферментов и позволяет длительно хранить образец при соблюдении требований к температуре, влажности и защите от света.
Сыворотка требует предварительного отделения клеточных элементов и обычно забирается в большем объёме, моча не подходит для универсального первичного выявления большинства целевых состояний, а пуповинная кровь может отражать материнские и перинатальные факторы и не всегда позволяет корректно оценить постнатальный метаболический статус ребёнка. Поэтому материалом первичного неонатального скрининга служит именно стандартизированная высушенная капиллярная кровь на фильтровальной бумаге. Положительный результат скрининга не является окончательным диагнозом и требует подтверждения в специализированной лаборатории.
| Материал или этап | Диагностическая характеристика | Практическое значение |
|---|---|---|
| Высушенная капиллярная кровь на фильтровальной бумаге | Стандартизированный DBS-образец с небольшим объёмом цельной крови | Основной материал для массового неонатального скрининга |
| Забор из пятки | Получение капиллярной крови после антисептической обработки и согревания конечности | Минимально травматичный способ, пригодный для новорождённых |
| Срок забора | Определяется национальным протоколом, обычно после начала энтерального питания | Позволяет выявлять функциональные метаболические и гормональные нарушения, которые могут быть неочевидны сразу после рождения |
| Исследуемые показатели | Гормоны, аминокислоты, ацилкарнитины, активность ферментов и другие маркеры | Применимы иммунные методы, ферментные тесты и тандемная масс-спектрометрия |
| Транспортировка | После полного высушивания карточка направляется в лабораторию без обязательного центрифугирования | Упрощает логистику и снижает требования к оснащению родовспомогательных учреждений |
| Критерии приемлемости образца | Полное пропитывание обозначенных кругов, отсутствие загрязнения, наслаивания крови и избыточной влаги | Неадекватный образец может привести к ложноотрицательному или недостоверному результату и требует повторного забора |
| Результат скрининга | Пороговое превышение маркера означает повышенный риск, а не подтверждённое заболевание | Необходимы повторное исследование и подтверждающая диагностика венозной крови, мочи, генетического или функционального теста |
Качество DBS напрямую влияет на аналитическую достоверность скрининга, поэтому карточку высушивают горизонтально и доставляют в лабораторию в установленном порядке. На концентрации маркеров могут влиять недоношенность, масса тела, переливание крови, парентеральное питание и тяжёлое состояние новорождённого. При наличии таких факторов сведения обязательно указывают в направлении, поскольку они учитываются при интерпретации результатов. Раннее выявление отклонений позволяет своевременно начать обследование и лечение до развития необратимых неврологических или соматических осложнений.