2) солевой агар
3) МПБ
4) простой агар
Возбудители газовой гангрены относятся преимущественно к клостридиям — спорообразующим облигатным анаэробам, среди которых клинически наиболее значимы Clostridium perfringens, C. novyi, C. septicum и C. histolyticum. Для их первичного выделения необходимы условия с минимальным содержанием кислорода, поскольку молекулярный кислород подавляет рост вегетативных форм этих микроорганизмов.
Среда Китта—Тароцци представляет собой восстановительную питательную среду на основе мясо-пептонного бульона с кусочками печени; поверхность обычно изолируют слоем вазелинового масла. Компоненты среды связывают растворённый кислород и формируют анаэробные условия, а богатый питательный состав обеспечивает накопление клостридий из исследуемого материала. После первичного роста из среды выполняют пересев на плотные анаэробные среды для получения изолированных колоний и выделения чистой культуры.
Мясо-пептонный бульон без специальных восстановительных компонентов не гарантирует достаточного анаэробиоза, а простой и солевой агар предназначены для других диагностических задач и не обеспечивают оптимального выделения клостридий. При дальнейшем изучении культуры оценивают характер роста, газообразование, гемолиз, морфологию клеток и наличие спор; окончательная идентификация проводится с учётом биохимических и, при необходимости, молекулярных тестов.
| Среда или метод | Наличие анаэробных условий | Основное назначение | Диагностическое значение при подозрении на газовую гангрену |
|---|---|---|---|
| Среда Китта—Тароцци | Создаются за счёт восстановительных компонентов и масляного слоя | Первичный посев, накопление и предварительное выделение анаэробов | Оптимальна для обогащения материала клостридиями и последующего получения чистой культуры |
| Мясо-пептонный бульон | Недостаточно выражены | Выращивание неспецифической факультативной микрофлоры | Не обеспечивает надёжного выделения облигатных анаэробов без дополнительной герметизации и восстановления среды |
| Простой агар | Обычно отсутствуют | Культивирование аэробных и факультативно-анаэробных бактерий | Может применяться только при создании специальных анаэробных условий, но не является оптимальной первичной средой |
| Солевой агар | Не формируются | Селективное культивирование солеустойчивых микроорганизмов, прежде всего стафилококков | Для выделения клостридий возбудителей газовой гангрены не предназначен |
| Кровяной агар в анаэростате | Создаются в анаэростате или другой герметичной системе | Получение изолированных колоний и оценка гемолиза | Позволяет выявлять характерный рост некоторых клостридий, включая двойную зону гемолиза у C. perfringens |
| Микроскопия культуры | Не относится к питательной среде | Оценка морфологии и спорообразования | Обнаружение крупных грамположительных палочек, спор и типичных морфологических признаков поддерживает диагноз, но не заменяет культивирование |
Выбор среды Китта—Тароцци основан на принципе направленного культивирования облигатных анаэробов в восстановительной питательной системе. Рост в этой среде сам по себе не является достаточным доказательством вида возбудителя, поскольку материал может содержать смешанную анаэробную флору. Поэтому обязательны пересев на плотные среды, выделение изолированной колонии и видовая идентификация. Лабораторное исследование проводят с соблюдением мер биологической безопасности, так как клостридии могут образовывать споры и продуцировать выраженные экзотоксины.