2) фитогемагглютинин (+)
3) нитросиний тетразолий
4) конго красный
Фитогемагглютинин (PHA) — лектин растительного происхождения, выделяемый из бобовых, который служит поликлональным митогеном преимущественно для Т-лимфоцитов. Он связывается с поверхностными гликопротеинами лимфоцита и активирует рецепторный комплекс TCR/CD3, что запускает внутриклеточную передачу сигнала, экспрессию рецептора интерлейкина-2, синтез цитокинов и переход клеток из фазы покоя G0 в клеточный цикл.
Под действием PHA малые покоящиеся лимфоциты увеличиваются в размерах, приобретают признаки бластных клеток и начинают пролиферировать. Это лежит в основе реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ), применяемой для оценки функциональной активности клеточного иммунитета: учитывают долю трансформированных клеток или индекс стимуляции по сравнению с нестимулированной культурой. В отличие от антиген-специфической пролиферации, ответ на PHA отражает общий митогенный потенциал Т-клеток.
Другие перечисленные вещества имеют иное назначение. Липополисахарид преимущественно активирует В-лимфоциты и клетки врождённого иммунитета через TLR4, нитросиний тетразолий используют для оценки кислородзависимого метаболического взрыва фагоцитов, а конго красный — для выявления амилоидных отложений. Поэтому именно PHA соответствует функциональному митогенному стимулу Т-лимфоцитов.
| Стимулятор или реагент | Основная клеточная мишень | Механизм или диагностическое применение |
|---|---|---|
| Фитогемагглютинин | Преимущественно Т-лимфоциты | Поликлональная активация через поверхностные гликопротеины и комплекс TCR/CD3; оценка бласттрансформации и пролиферативного ответа |
| Конканавалин A | Преимущественно Т-лимфоциты | Лектиновый митоген; используется как альтернативный стимулятор клеточного иммунного ответа in vitro |
| Митоген лаконоса (PWM) | Т- и В-лимфоциты | Индуцирует смешанный пролиферативный ответ, включая Т-клеточную помощь В-лимфоцитам |
| Липополисахарид | В-лимфоциты, моноциты и макрофаги | Активация преимущественно через TLR4; характерен для оценки ответов врождённого иммунитета и В-клеточной активации |
| Нитросиний тетразолий | Нейтрофилы и другие фагоциты | Восстанавливается при образовании активных форм кислорода; применяется в тесте восстановления НСТ для оценки окислительного взрыва |
| Конго красный | Амилоидные белковые отложения | Гистохимическое выявление амилоида, дающее характерное яблочно-зелёное двулучепреломление в поляризованном свете |
Снижение ответа на PHA может свидетельствовать о дефекте количества или функциональной активности Т-лимфоцитов. Интерпретация РБТЛ проводится с учётом жизнеспособности клеток, условий культивирования и контрольной нестимулированной культуры. Нормальная реакция на митоген не исключает нарушений антиген-специфического иммунного ответа. Метод имеет преимущественно функциональное, а не этиологическое значение и должен оцениваться вместе с иммунологическими и клиническими данными.