2) казеиново-угольный (+)
3) Тайера-Мартина
4) кровяной
Казеиново-угольный агар, соответствующий принципу среды Regan–Lowe, оптимален для первичного посева клинического материала при подозрении на коклюш. Bordetella pertussis относится к требовательным, медленно растущим грамотрицательным бактериям, чувствительным к токсическим метаболитам и ингибирующим веществам питательной среды. Активированный уголь адсорбирует свободные жирные кислоты, перекиси и другие соединения, способные подавлять рост возбудителя, а гидролизат казеина служит источником аминокислот и азотистых веществ.
Для повышения селективности в среду могут добавлять антибиотик, чаще цефалексин, который подавляет сопутствующую микрофлору носоглотки, но сохраняет возможность роста B. pertussis. Материал получают с задней стенки носоглотки тампоном из дакрона или синтетического волокна либо методом назофарингеальной аспирации. Наибольшая диагностическая чувствительность культурального исследования отмечается в катаральном периоде и в начале спазматического кашля, особенно до назначения антибактериальной терапии.
| Среда или метод | Основное назначение | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Казеиново-угольный агар | Первичное выделение Bordetella pertussis | Уголь нейтрализует ингибиторы, гидролизат казеина обеспечивает питательные факторы |
| Среда Regan–Lowe с цефалексином | Селективное культивирование бордетелл | Подавляет сопутствующую микрофлору носоглотки и повышает вероятность выделения возбудителя |
| Среда Борде–Жангу | Классическая среда для культивирования B. pertussis | Содержит картофельно-глицериновую основу и кровь; применяется реже современных угольных сред |
| Агар Тайера–Мартина | Селективное выделение патогенных нейссерий | Предназначен преимущественно для Neisseria gonorrhoeae и N. meningitidis |
| Обычный кровяной агар | Культивирование многих бактерий | Не обеспечивает оптимальной нейтрализации токсических веществ, поэтому недостаточно эффективен для первичного выделения B. pertussis |
| Полимеразная цепная реакция | Обнаружение специфической ДНК Bordetella | Обладает высокой чувствительностью в ранние сроки, но не позволяет оценить жизнеспособность бактерий |
| Культуральное исследование | Подтверждение наличия жизнеспособного возбудителя | Специфично, но чувствительность снижается при позднем заборе материала и после антибиотикотерапии |
При росте на угольной среде B. pertussis образует мелкие, гладкие, выпуклые, блестящие колонии, появляющиеся обычно через несколько суток инкубации при 35–37 °C. Видовую идентификацию проводят с использованием биохимических, антигенных или молекулярно-генетических методов. Отрицательный посев не исключает коклюш, если материал получен поздно, с нарушением техники забора либо после начала лечения. Поэтому культуральный метод целесообразно сочетать с ПЦР и серологической диагностикой с учетом срока заболевания.