2) эритроцитов
3) нейтрофилов
4) моноцитов
Суправитальная окраска бриллиантовым крезиловым синим применяется для выявления ретикулоцитов — молодых форм эритроцитов, которые уже утратили ядро, но сохраняют остаточную цитоплазматическую РНК и отдельные органеллы. Исследование проводят на нативной, нефиксированной крови: краситель проникает в клетки и связывается с полинуклеотидными структурами, формируя сине-фиолетовую зернистость или сетчатый рисунок, называемый ретикулумом.
Зрелые эритроциты лишены ядра и практически не содержат РНК, поэтому ретикулоплазматическая сетка в них не выявляется. Ретикулоциты обнаруживают по наличию окрашенных гранул и нитей, а их процентное и абсолютное количество отражает активность эритропоэза в костном мозге. Повышение числа ретикулоцитов характерно для усиленной регенерации эритроцитов, например при гемолизе или после острой кровопотери; недостаточный ретикулоцитарный ответ указывает на гипопролиферативный характер анемии.
Метод имеет преимущество перед обычной окраской мазка по Романовскому при подсчёте ретикулоцитов, поскольку позволяет непосредственно выявить остаточную РНК в живых клетках. Для оценки регенераторной способности костного мозга используют не только процент ретикулоцитов, но и абсолютное содержание, а при выраженной анемии — скорректированный ретикулоцитарный индекс.
| Объект или показатель | Особенности клеточного состава | Результат при окраске бриллиантовым крезиловым синим | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Ретикулоцит | Безъядерная молодая эритроидная клетка, сохраняющая остаточную РНК | Сине-фиолетовые гранулы и сетчатые нити в цитоплазме | Основной объект подсчёта; отражает регенерацию эритроцитов |
| Зрелый эритроцит | Не содержит ядра и значимого количества цитоплазматической РНК | Ретикулум не выявляется; клетка окрашивается равномерно и слабее | Не относится к ретикулоцитам |
| Нейтрофил | Имеет сегментированное ядро и гранулы, но не является мишенью метода | Не оценивается по наличию ретикулума | Подсчёт нейтрофилов выполняют в окрашенном мазке крови с дифференцировкой лейкоцитов |
| Моноцит | Крупная лейкоцитарная клетка с бобовидным ядром и азурофильными гранулами | Не используется для идентификации этим методом | Количество определяют при лейкоцитарной формуле и общем анализе крови |
| Повышенное содержание ретикулоцитов | Ускоренный выход молодых эритроцитов из костного мозга | Увеличение доли клеток с ретикулофиламентозной сеткой | Возможны гемолиз, восстановление после кровопотери или эффективная терапия дефицитной анемии |
| Сниженный ретикулоцитарный ответ | Недостаточное образование эритроидных клеток | Мало клеток с окрашенным ретикулумом | Характерен для аплазии костного мозга, дефицита железа, витамина B12 или фолата, хронической болезни почек |
| Абсолютное число ретикулоцитов | Рассчитывается с учётом количества эритроцитов или объёма крови | Позволяет количественно оценить выявленные клетки | Надёжнее процента при выраженной анемии и необходим для оценки адекватности эритропоэза |
Таким образом, специфическим признаком ретикулоцита является выявление внутриклеточного остаточного ретикулума в суправитально окрашенной крови. Метод не предназначен для морфологической классификации лейкоцитов и не используется как стандартный способ подсчёта зрелых эритроцитов. Интерпретация результата должна учитывать степень анемии, поскольку высокий процент ретикулоцитов не всегда означает достаточную продукцию эритроцитов. Наиболее информативна совокупная оценка ретикулоцитов, абсолютного ретикулоцитарного числа и клинико-лабораторных признаков анемии.