2) ингибитор гликолиза
3) антикоагулянт, без соблюдения особых требований к температуре хранения образца
4) антикоагулянт, с последующим замораживанием плазмы при необходимости ее хранения (+)
Для определения АКТГ используют плазму, полученную из венозной крови с антикоагулянтом, преимущественно с ЭДТА (K2— или K3-ЭДТА). Сыворотка, полученная в пробирке с активатором свертывания, не является оптимальным материалом, поскольку АКТГ представляет собой лабильный пептидный гормон и быстро подвергается протеолитической деградации после взятия крови. Ингибитор гликолиза необходим для исследований углеводного обмена, но не обеспечивает сохранность АКТГ.
После взятия кровь с ЭДТА следует как можно быстрее охладить, отделить плазму и при необходимости хранения заморозить. Длительное пребывание цельной крови или плазмы при комнатной температуре приводит к снижению измеряемой концентрации гормона и риску ложно низкого результата. Замороженную плазму хранят согласно инструкции лабораторной методики, обычно при температуре не выше −20 °C, а для более длительного хранения — при −70 °C и ниже; повторные циклы замораживания и размораживания недопустимы.
| Преаналитический фактор | Рекомендуемое условие | Значение для результата |
|---|---|---|
| Материал | Плазма венозной крови | Позволяет исследовать АКТГ в жидкой части крови без длительного контакта с клеточными элементами |
| Антикоагулянт | ЭДТА | Предотвращает свертывание и обеспечивает получение плазмы, пригодной для определения АКТГ |
| Пробирка с активатором свертывания | Не является предпочтительной | Формируется сыворотка; возможна большая нестабильность гормона и несоответствие валидированной методике |
| Температурный режим сразу после взятия | Быстрое охлаждение, обычно транспортировка при 2–8 °C | Замедляет деградацию АКТГ и уменьшает вероятность ложно низкой концентрации |
| Хранение отделенной плазмы | Замораживание при необходимости отсроченного анализа | Сохраняет концентрацию гормона в течение установленного лабораторным регламентом срока |
| Повторное размораживание | Не допускается; плазму желательно разделить на аликвоты | Повторные температурные циклы ускоряют разрушение АКТГ и повышают аналитическую вариабельность |
| Время взятия крови | Обычно утром, с учетом клинической задачи | АКТГ имеет выраженный циркадный и пульсирующий характер секреции, поэтому время взятия влияет на интерпретацию |
Концентрацию АКТГ интерпретируют совместно с уровнем кортизола и клиническими данными, поскольку изолированное значение не всегда позволяет различить первичную и вторичную надпочечниковую недостаточность. Для сопоставимости результатов желательно соблюдать одинаковое время взятия и учитывать стресс, физическую нагрузку и лекарственную терапию. Таким образом, ключевыми условиями являются использование ЭДТА-плазмы, быстрое охлаждение, своевременное отделение плазмы и ее замораживание при отсроченном исследовании.