2) щелочеустойчивость
3) кислотоустойчивость (+)
4) спиртоустойчивость
Окраска по Цилю–Нильсену выявляет кислотоустойчивость микобактерий, прежде всего представителей комплекса Mycobacterium tuberculosis. Это свойство обусловлено особенностями клеточной стенки: высоким содержанием липидов, включая миколовые кислоты, связанные с арабиногалактаном и пептидогликаном. Гидрофобный липидный слой препятствует проникновению обесцвечивающих растворов и удерживает основной краситель внутри клетки.
При методике горячий карболовый фуксин проникает в бактериальную клетку, после чего препарат обрабатывают кислотно-спиртовым раствором. Кислотоустойчивые микобактерии сохраняют красную окраску, тогда как большинство других бактерий обесцвечивается и выявляется контрастным красителем, обычно метиленовым синим. Поэтому положительным результатом считают обнаружение тонких красных палочек на синем фоне.
Кислотоустойчивость является тинкториальным признаком, а не самостоятельным доказательством видовой принадлежности возбудителя: сходным свойством могут обладать нетуберкулёзные микобактерии. В клиническом материале, особенно в мокроте, выявление кислотоустойчивых бактерий поддерживает диагноз микобактериальной инфекции, но требует подтверждения культуральными, молекулярно-генетическими или иными специфическими методами.
| Критерий | Характеристика |
|---|---|
| Основной диагностический признак | Сохранение красной окраски после обработки кислотно-спиртовым обесцвечивающим раствором |
| Структурная основа | Липидная клеточная стенка с высоким содержанием миколовых кислот |
| Основной краситель | Карболовый фуксин, обеспечивающий интенсивное окрашивание микобактерий |
| Этап обесцвечивания | Кислотно-спиртовая обработка; у кислотоустойчивых бактерий краситель не удаляется |
| Контрастное окрашивание | Метиленовый синий окрашивает фон и некислотоустойчивые микроорганизмы в синий цвет |
| Микроскопическая картина | Тонкие красные палочки, расположенные поодиночке или небольшими скоплениями на синем фоне |
| Диагностическое значение | Указывает на наличие кислотоустойчивых бактерий, но не позволяет без дополнительных тестов отличить M. tuberculosis от нетуберкулёзных микобактерий |
Кислотоустойчивость связана с химическим составом клеточной стенки и определяет устойчивость микобактерий к обесцвечиванию кислотой и спиртом во время окраски. Отрицательный результат микроскопии не исключает туберкулёз, поскольку чувствительность метода зависит от бактериальной нагрузки и качества материала. Для уточнения диагноза применяют посев и методы амплификации нуклеиновых кислот, позволяющие подтвердить вид возбудителя и выявить лекарственную устойчивость.