2) определение в крови или носоглоточной слизи антигена Bordetella pertussis
3) серологический (иммуноферментный) анализ
4) молекулярно-генетический и бактериологический методы (+)
В первые две недели коклюша возбудитель активно размножается на слизистой оболочке носоглотки и выделяется с секретом дыхательных путей. Поэтому основными методами подтверждения инфекции являются бактериологическое исследование и молекулярно-генетическая диагностика: посев материала позволяет выделить Bordetella pertussis, а ПЦР — обнаружить специфические фрагменты ДНК возбудителя. Исследуют мазок или, предпочтительнее, аспират из носоглотки, взятые до начала антибактериальной терапии либо в максимально ранние сроки.
Наибольшая диагностическая ценность бактериологического метода отмечается в катаральном периоде и в начале периода спазматического кашля; затем количество возбудителя в носоглотке уменьшается, особенно после лечения антибиотиками. ПЦР обладает более высокой чувствительностью и позволяет получить результат быстрее, однако положительный результат должен оцениваться с учетом клинической картины и качества взятия материала. Серологические методы становятся информативными преимущественно со второй–третьей недели заболевания, когда формируется антительный ответ, поэтому для ранней диагностики они менее пригодны.
Методы выявления антигена, реакция пассивной гемагглютинации и биологическая проба имеют ограниченную чувствительность, специфичность или практическую применимость и не относятся к оптимальному комплексу исследований в начальные сроки. Лабораторным подтверждением коклюша служит обнаружение ДНК B. pertussis методом ПЦР либо выделение культуры возбудителя с ее последующей идентификацией.
| Метод | Исследуемый материал | Оптимальные сроки | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| ПЦР | Мазок или аспират из носоглотки | Первые 2–3 недели болезни | Быстрое обнаружение специфической ДНК B. pertussis; высокая чувствительность |
| Бактериологический посев | Носоглоточный аспират или глубокий мазок | Катаральный период и начало приступообразного кашля | Выделение живой культуры и ее идентификация; подтверждает этиологию инфекции |
| Серологический анализ | Сыворотка крови | Со 2–3-й недели, чаще на поздних этапах | Выявление антител; особенно полезен при позднем обращении |
| Выявление антигена | Секрет носоглотки | Ранние сроки | Возможно быстрое исследование, но ограничено недостаточной чувствительностью и стандартизацией |
| Реакция пассивной гемагглютинации | Сыворотка крови | После развития гуморального ответа | Исторически применявшийся серологический подход; уступает современным методам |
| Биологический метод | Клинический материал | Не является методом первичного выбора | Трудоемок, длителен и ограниченно применим в современной рутинной диагностике |
| Влияние антибиотиков | Материал из носоглотки | После начала терапии | Снижает вероятность выделения культуры; ПЦР также следует выполнять как можно раньше |
Для корректного результата материал берут из носоглотки, а не из ротоглотки или слюны, поскольку именно в носоглотке локализуется возбудитель. Отрицательный результат посева не исключает коклюш при позднем обследовании или предшествующем приеме антибиотиков. При наличии типичного приступообразного кашля отрицательные данные должны интерпретироваться совместно с эпидемиологическим анамнезом и результатом ПЦР.