2) 90
3) 50
4) 35 (+)
Метилирование промоторной области гена MGMT выявляется приблизительно у одной трети глиобластом, поэтому значение 35% используется как округлённый эпидемиологический показатель. В отдельных исследованиях частота составляет около 37%, тогда как в современных сериях IDH-дикого типа может достигать 40–50%; различия связаны с составом выборки, исследуемыми CpG-участками, методом анализа и установленным порогом положительного результата. Следовательно, 35% следует понимать не как абсолютную константу, а как типичную экзаменационную оценку распространённости признака.
Ген MGMT кодирует O6-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазу — фермент прямой репарации ДНК, удаляющий алкильные группы из положения O6 гуанина. Метилирование CpG-островков промотора подавляет транскрипцию гена и снижает содержание фермента в опухолевых клетках. В результате повреждения ДНК, создаваемые темозоломидом, не устраняются, возникают ошибочные спаривания O6-метилгуанина с тимином, повторные циклы системы репарации неспаренных оснований, разрывы ДНК и гибель опухолевой клетки.
Статус промотора MGMT является прежде всего предиктивным биомаркером чувствительности глиобластомы IDH-дикого типа к алкилирующей химиотерапии. При метилированном промоторе вероятность клинической пользы от темозоломида выше, тогда как сохранённая экспрессия MGMT способствует лекарственной резистентности. Наиболее доказанное значение этот показатель имеет в контексте лечения темозоломидом; интерпретировать его как полностью независимый от терапии прогностический фактор некорректно.
| Категория или метод | Молекулярный признак | Клиническая интерпретация |
|---|---|---|
| Метилированный промотор MGMT | Эпигенетическое подавление транскрипции, низкая активность фермента репарации | Повышенная чувствительность к темозоломиду и другим алкилирующим препаратам |
| Неметилированный промотор | Сохранённая экспрессия MGMT и эффективное удаление O6-алкильных повреждений | Относительная устойчивость опухоли к темозоломиду |
| Пограничная, или серая , зона | Низкий уровень метилирования около лабораторного порога | Результат оценивают с учётом методики, качества ткани и валидированного диапазона лаборатории |
| Метилспецифическая ПЦР | Качественное или полуколичественное выявление метилированной ДНК после бисульфитной конверсии | Высокая чувствительность, но результат зависит от праймеров и выбранных CpG-участков |
| Пиросеквенирование | Количественное определение доли метилирования отдельных CpG-позиций | Позволяет выделять неметилированные, пограничные и уверенно метилированные образцы |
| Иммуногистохимия MGMT | Оценка экспрессии белка в ядрах опухолевых клеток | Менее стандартизована и не считается полноценной заменой анализа метилирования промотора |
| Нозологическая принадлежность | Согласно WHO CNS5, термин глиобластома относится к диффузной астроцитарной опухоли IDH-дикого типа | Астроцитома с мутацией IDH и признаками IV степени обозначается как астроцитома, IDH-мутантная, CNS WHO grade 4 |
Исследование метилирования выполняют на репрезентативной опухолевой ткани с достаточной долей неопластических клеток, поскольку некроз, примесь нормальной ткани и внутриопухолевая гетерогенность могут исказить результат. Универсального количественного порога для всех аналитических платформ не существует, поэтому заключение должно содержать используемый метод и лабораторные критерии интерпретации. Особенно важен статус MGMT при выборе терапии у пожилых или соматически ослабленных пациентов, когда рассматривается преимущественное применение лучевой терапии либо темозоломида. Молекулярный показатель оценивают совместно с возрастом, функциональным статусом, объёмом резекции и интегрированным гистомолекулярным диагнозом.