2) может быть диагностирован при помощи иммунофенотипирования методом проточной цитометрии при доступности свежего или фиксированного в парафине материала
3) не может быть диагностирован
4) может быть диагностирован при помощи иммунофенотипирования методом проточной цитометрии только в случае нейрорецидива
Изолированный экстрамедуллярный рецидив острого лимфобластного лейкоза означает повторное выявление опухолевого лимфобластного клона вне костного мозга при отсутствии диагностически значимой лейкемической инфильтрации в костномозговом пунктате. Опухолевые клетки могут обнаруживаться в спинномозговой жидкости, лимфатическом узле, мягких тканях, коже, яичке, плевральной или другой серозной полости. Проточная цитометрия позволяет подтвердить наличие популяции бластов по сочетанию антигенов, характерному для исходного клона, и отличить её от реактивных лимфоцитов.
Метод требует свежего материала, содержащего жизнеспособные клетки, которые переводят в клеточную суспензию и окрашивают панелью моноклональных антител. Фиксация в формалине и заключение ткани в парафин приводят к утрате клеточной жизнеспособности и изменению мембранных антигенов, поэтому такой материал непригоден для стандартной проточной цитометрии; в этом случае используют иммуногистохимию, молекулярно-генетическое исследование и оценку морфологии. Диагноз основывают на совокупности клинических данных, морфологического выявления бластов, иммунофенотипа и, при возможности, подтверждения исходного клонального маркера.
| Ситуация | Материал | Роль проточной цитометрии | Дополнительные методы и особенности |
|---|---|---|---|
| Изолированный нейрорецидив | Свежая спинномозговая жидкость | Выявление малой популяции лимфобластов; особенно важно при низкой клеточности образца | Цитологическое исследование, оценка клеточности и неврологическая симптоматика; результат интерпретируют с учётом возможной контаминации кровью |
| Рецидив в лимфатическом узле или мягких тканях | Свежий материал биопсии либо клеточная суспензия | Определение патологического В- или Т-линейного иммунофенотипа и его сопоставление с исходным лейкозом | Гистология, иммуногистохимия и молекулярное исследование клональности |
| Рецидив в яичке | Свежий биопсийный материал при его получении | Подтверждение инфильтрации бластами и их принадлежности к лейкемическому клону | Клинический осмотр, ультразвуковое исследование, гистология; необходима оценка костного мозга для исключения комбинированного рецидива |
| Поражение серозной полости | Свежий плевральный, перитонеальный или другой выпот | Выявление опухолевых клеток среди мезотелиальных и воспалительных элементов | Цитология, биохимическое исследование жидкости и иммунологическое подтверждение линии клеток |
| Фиксированная ткань, заключённая в парафин | Парафиновый блок или срезы | Стандартная проточная цитометрия невозможна из-за отсутствия жизнеспособной клеточной суспензии | Иммуногистохимия, FISH, ПЦР или секвенирование; сохранность антигенов зависит от фиксации и обработки ткани |
| Сомнительный результат или фенотипический сдвиг | Свежий материал из очага рецидива и архивный образец первичного лейкоза | Сравнение экспрессии антигенов с исходным иммунофенотипом; оценка минимальной остаточной болезни возможна только при валидированной панели | Молекулярное выявление rearrangement генов иммуноглобулинов или T-клеточного рецептора, химерных транскриптов и других клональных маркеров |
Таким образом, доступность свежего материала является ключевым условием применения проточной цитометрии при экстрамедуллярном рецидиве. Метод не ограничивается поражением центральной нервной системы и может использоваться при различных локализациях, если получена жизнеспособная клеточная суспензия. Отрицательный результат не исключает рецидив при малой опухолевой массе, плохой сохранности клеток или недостаточном объёме образца. Поэтому заключение должно учитывать чувствительность метода и дополняться морфологическими, иммуногистохимическими и молекулярными исследованиями.