2) с помощью реагентов анти-А и анти-В и дополнительно анти-АВ
3) антигенов ЭРИТРоцитов и естественных антител в сыворотке крови (+)
4) изогемоагглютининов и групповых веществ в сыворотке донора
Перекрёстный метод определения группы крови по системе ABO основан на одновременном исследовании двух взаимодополняющих признаков: антигенов A и B на поверхности эритроцитов и естественных антител (изогемагглютининов) анти-A и анти-B в плазме или сыворотке. Прямое типирование выполняют с моноклональными реагентами анти-A и анти-B, оценивая агглютинацию эритроцитов пациента. Обратное типирование проводят, исследуя сыворотку с тест-эритроцитами известных групп, обычно A1 и B, что позволяет выявить ожидаемые естественные антитела.
Такой подход повышает надёжность определения группы крови, поскольку результаты прямой и обратной реакции должны взаимно подтверждать друг друга. Например, при группе A на эритроцитах определяется антиген A, а в сыворотке присутствуют антитела анти-B; при группе B наблюдается обратная картина. Несоответствие результатов рассматривается как ABO-дискордантность и требует выяснения причины до выдачи окончательного заключения, поскольку ошибки групповой принадлежности могут привести к острой гемолитической трансфузионной реакции.
У новорождённых и детей первых месяцев жизни обратное типирование имеет ограничения: естественные антитела системы ABO формируются постепенно и могут отсутствовать или иметь низкий титр. Поэтому в педиатрической практике интерпретацию проводят с учётом возраста пациента, клинической ситуации, предшествующих трансфузий, трансплантации гемопоэтических стволовых клеток и возможного иммунодефицита.
| Группа ABO | Антигены на эритроцитах | Естественные антитела в сыворотке | Реакция с анти-A | Реакция с анти-B | Обратное типирование |
|---|---|---|---|---|---|
| O (I) | A и B отсутствуют | анти-A и анти-B | Отрицательная | Отрицательная | Агглютинация эритроцитов A1 и B |
| A (II) | A | анти-B | Положительная | Отрицательная | Агглютинация тест-эритроцитов B |
| B (III) | B | анти-A | Отрицательная | Положительная | Агглютинация тест-эритроцитов A1 |
| AB (IV) | A и B | Обычно отсутствуют | Положительная | Положительная | Агглютинация с A1 и B отсутствует |
| Прямое типирование | Определяет антигены эритроцитов пациента | Используются специфические реагенты анти-A и анти-B | |||
| Обратное типирование | Определяет естественные антитела сыворотки пациента | Используются стандартные тест-эритроциты известных групп | |||
| ABO-дискордантность | Несоответствие прямого и обратного исследования | Требует повторного исследования и исключения технических, иммуногематологических и клинических причин | |||
Перекрёстное определение группы ABO является принципом взаимного контроля двух независимых иммуногематологических реакций. Оно особенно важно перед трансфузией компонентов крови, поскольку несовместимость по ABO может вызвать быстрое внутрисосудистое разрушение эритроцитов. При любых сомнительных или противоречивых результатах группу крови не считают окончательно установленной до разрешения расхождений. В педиатрии возрастные особенности формирования естественных антител обязательно учитываются при интерпретации обратной реакции.