2) формалина раствор 10% (+)
3) тиогликолевой среды раствор 10%
4) натрия азотнокислого раствор 1%
Для консервации половозрелых гельминтов и их фрагментов используют 10% раствор формалина, предпочтительно нейтральный. В лабораторной практике такой раствор содержит примерно 4% формальдегида и действует как фиксатор: формальдегид образует поперечные связи между белковыми молекулами, прекращая аутолиз и подавляя бактериальное разложение тканей.
Фиксация стабилизирует внешний вид паразита и сохраняет признаки, необходимые для морфологической идентификации: форму тела, членистость стробилы, наличие и строение сколекса, присосок, крючьев, кутикулы и других диагностически значимых структур. Объект должен быть полностью погружён в достаточный объём раствора; после фиксации материал хранят в герметично закрытой маркированной ёмкости. Формалин сохраняет морфологию, но не поддерживает жизнеспособность гельминта.
| Среда или раствор | Основное назначение | Значение для материала гельминтов |
|---|---|---|
| 10% раствор формалина | Фиксация и консервация биологических объектов | Предотвращает аутолиз и гниение, сохраняет макро- и микроморфологические признаки взрослых гельминтов и их фрагментов |
| Формалин как химический фиксатор | Стабилизация белковых структур тканей | Формирует межбелковые сшивки и прекращает ферментативное разрушение паразита |
| Среда Кесслера | Микробиологические исследования и культивирование отдельных групп микроорганизмов | Не является стандартной средой для фиксации и длительного хранения половозрелых гельминтов |
| Тиогликолевая среда | Выращивание микроорганизмов, особенно анаэробных, благодаря восстановительным свойствам | Не фиксирует ткани гельминта и не обеспечивает их морфологическую консервацию |
| 1% раствор натрия азотнокислого | Раствор с иными лабораторными и физико-химическими применениями | Не обладает необходимым фиксирующим действием и не используется как стандартный консервант взрослых гельминтов |
| Этанол 70–96% | Альтернативная фиксация и хранение отдельных паразитологических образцов | Может применяться для сохранения материала, в том числе перед молекулярными исследованиями, но способен вызывать усадку и деформацию тканей |
| Формалин для молекулярной диагностики | Морфологическое, а не преимущественно генетическое сохранение образца | Длительная фиксация может ухудшать выделение ДНК и результаты амплификационных методов |
Таким образом, правильный выбор определяется необходимостью сохранить диагностическую морфологию паразита, а не обеспечить его рост или жизнеспособность. Перед помещением в консервант образец осматривают, по возможности расправляют и снабжают направлением с данными пациента и места обнаружения. Для последующего ПЦР-исследования предпочтительнее заранее выделить отдельный фрагмент и поместить его в этанол, поскольку формалин может снижать качество нуклеиновых кислот.