2) пункционная биопсия инвазивной протоковой карциномы; 8 часов (+)
3) эксцизионная биопсия инвазивной протоковой карциномы; 50 часов
4) пункционная биопсия инвазивной протоковой карциномы; 41 минуты
Для иммуногистохимического определения HER2 оптимальным материалом является пункционная биопсия инвазивной протоковой карциномы, помещённая в 10% нейтральный буферный формалин примерно на 8 часов. HER2 — трансмембранный рецептор с тирозинкиназной активностью; его гиперэкспрессия выявляется по интенсивности и полноте мембранного окрашивания опухолевых клеток. Трепанобиоптат быстро и равномерно фиксируется, содержит жизнеспособную инвазивную опухолевую ткань и позволяет своевременно определить показания к анти-HER2-терапии.
Для сохранения антигенности HER2 важны короткая холодовая ишемия и стандартизированная фиксация: общепринятым является 10% нейтральный буферный формалин, обычно в пределах 6–72 часов, при этом около 8 часов обеспечивает надежную фиксацию небольшого биопсийного материала. Фиксация всего 41 минуту недостаточна и может привести к аутолизу и слабому, ложноотрицательному окрашиванию. Эксцизионный материал, фиксированный 50 часов, в ряде протоколов формально укладывается в допустимый интервал, однако большой объем ткани повышает риск неравномерного проникновения формалина и преаналитической вариабельности. При карциноме in situ рутинное исследование HER2 обычно не используется для выбора системной терапии, поскольку основное клиническое значение имеет HER2-статус инвазивного компонента.
| Объект или условие | Значение для исследования HER2 | Диагностический комментарий |
|---|---|---|
| Пункционная биопсия инвазивной протоковой карциномы | Предпочтительный материал | Содержит инвазивную опухоль и обычно обеспечивает равномерную фиксацию при небольшом объеме ткани |
| Эксцизионная биопсия или резекционный материал | Допустимый, но более вариабельный материал | В крупном образце возможны неодинаковая скорость проникновения формалина и различия фиксации в центре и по периферии |
| Протоковая карцинома in situ | Не является стандартной мишенью для рутинного HER2-тестирования | Определение HER2 преимущественно требуется для инвазивной карциномы, влияющей на выбор таргетной терапии |
| 10% нейтральный буферный формалин | Стандартный фиксатор | Стабилизирует ткань и сохраняет морфологию, но образует белковые сшивки, поэтому чрезмерная фиксация ухудшает доступ антитела к антигену |
| Фиксация около 8 часов | Оптимальный преаналитический режим для небольшого биоптата | Соответствует рекомендованному интервалу и снижает риск как недофиксации, так и избыточного маскирования антигена |
| Фиксация 41 минуту | Недостаточная | Повышается вероятность аутолиза, артефактов и ложноотрицательной или неинтерпретируемой реакции |
| Интерпретация ИГХ HER2 | 0/1+ — отрицательный, 3+ — положительный результат | Результат 2+ является пограничным и требует подтверждения методом in situ гибридизации для оценки амплификации гена ERBB2 |
Корректная оценка HER2 начинается до этапа окрашивания и зависит от соблюдения условий забора, доставки и фиксации ткани. При неудовлетворительном качестве материала возможна повторная оценка на другом блоке или подтверждение результата методом ISH. Итоговое заключение должно учитывать морфологию опухоли, выраженность мембранного окрашивания и результаты рефлексного тестирования при пограничном ИГХ-показателе. Стандартизация преаналитического этапа необходима для безопасного назначения анти-HER2-препаратов.