2) люминесцентная бактериоскопия мокроты
3) простая микроскопия мокроты
4) проба Манту
Люминесцентная бактериоскопия мокроты основана на выявлении кислотоустойчивых микобактерий после окрашивания флуорохромами, чаще аурамином или аурамин-родамином. Клеточная стенка микобактерий содержит большое количество миколовых кислот, поэтому они сохраняют краситель при обработке кислотно-спиртовым раствором и светятся в люминесцентном микроскопе. Метод позволяет быстро обнаружить микобактерии туберкулёзного комплекса в дыхательном материале и отличается большей чувствительностью по сравнению с обычной световой микроскопией.
Положительный результат бактериоскопии мокроты имеет диагностическое и эпидемиологическое значение: он свидетельствует о наличии кислотоустойчивых микобактерий и повышенной вероятности заразности пациента. При этом микроскопия не позволяет надёжно отличить Mycobacterium tuberculosis от нетуберкулёзных микобактерий и не определяет лекарственную устойчивость, поэтому результат подлежит подтверждению молекулярно-генетическим или культуральным исследованием. Отрицательный мазок не исключает туберкулёз, особенно при малом количестве возбудителя или недостаточном качестве образца.
Проба Манту и Диаскинтест являются иммунологическими кожными тестами: они выявляют сенсибилизацию Т-лимфоцитов к микобактериальным антигенам, но не обнаруживают возбудителя непосредственно и не подтверждают активный туберкулёз. Простая микроскопия мокроты в световом микроскопе также выявляет кислотоустойчивые бактерии, однако имеет меньшую чувствительность. Поэтому среди перечисленных методов наиболее доступным и информативным методом прямого лабораторного обнаружения микобактерий является люминесцентная бактериоскопия мокроты.
| Метод | Что выявляет | Основной диагностический принцип | Клиническое значение и ограничения |
|---|---|---|---|
| Люминесцентная бактериоскопия мокроты | Кислотоустойчивые микобактерии | Флуорохромное окрашивание и выявление светящихся микобактерий в люминесцентном микроскопе | Быстрый и относительно доступный метод; чувствительнее обычной микроскопии, но не определяет вид микобактерий и лекарственную устойчивость |
| Простая микроскопия мокроты | Кислотоустойчивые бактерии | Окрашивание по Цилю—Нильсену и исследование в световом микроскопе | Доступна, но требует большей бактериальной нагрузки и обычно уступает люминесцентному методу по чувствительности |
| Молекулярно-генетическое исследование | ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса | Амплификация специфических участков генома, например методом ПЦР | Быстро подтверждает инфекцию и в ряде тест-систем выявляет устойчивость к рифампицину; доступность зависит от оснащения лаборатории |
| Культуральное исследование | Живые микобактерии | Посев материала на питательные среды с последующей идентификацией культуры | Референсный метод подтверждения и определения лекарственной чувствительности, но результат получают значительно позже |
| Проба Манту | Иммунную реакцию на туберкулин | Оценка размера инфильтрата через 72 часа после внутрикожного введения антигена | Определяет инфицированность или поствакцинальную сенсибилизацию; не подтверждает активный туберкулёз |
| Диаскинтест | Клеточную сенсибилизацию к специфическим антигенам M. tuberculosis | Оценка местной гиперчувствительности замедленного типа | Более специфичен для туберкулёзной инфекции, чем проба Манту, но также не является прямым выявлением микобактерий |
Исследовать следует качественно собранную мокроту, предпочтительно полученную после глубокого откашливания из нижних дыхательных путей. При подозрении на туберкулёз отрицательный результат одного мазка требует повторного обследования и применения более чувствительных методов. Современная диагностика обычно сочетает микроскопию с быстрым молекулярным тестом и культуральным исследованием. Выявление кислотоустойчивых микобактерий должно сопровождаться дальнейшей видовой идентификацией и оценкой лекарственной устойчивости.