2) высоту, эквивалентную теоретической тарелке (ВЭТТ)
3) время удерживания (tR)
4) площадь пика (S) (+)
К количественным параметрам хроматографии относят площадь пика, поскольку она характеризует количество вещества, поступившего в детектор. Площадь представляет собой интеграл сигнала детектора по времени элюирования: S = ∫ сигнал dt. В пределах линейного диапазона методики эта величина прямо или пропорционально связана с концентрацией либо массой аналита, поэтому по площади пика рассчитывают содержание токсического вещества, лекарственного препарата или его метаболита в исследуемом объекте.
В судебно-химическом анализе количественную оценку проводят по калибровочной зависимости, построенной на стандартных образцах, часто с использованием внутреннего стандарта и отношения площадей пиков аналит/внутренний стандарт . Площадь обычно предпочтительнее высоты пика, поскольку меньше зависит от вариаций ширины и формы хроматографической зоны. Время удерживания служит преимущественно для качественной идентификации, а число теоретических тарелок и высота, эквивалентная теоретической тарелке, характеризуют эффективность разделения колонки, но не содержание вещества.
| Параметр | Группа | Что отражает | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Площадь пика (S) | Количественный | Интегральный отклик детектора за время прохождения аналита | Расчёт концентрации или массы вещества по калибровочной зависимости |
| Отношение площадей пиков | Количественный нормированный | Соотношение сигнала аналита и внутреннего стандарта | Повышение точности при учёте потерь на пробоподготовке и колебаний ввода пробы |
| Время удерживания (tR) | Качественный | Время выхода компонента из колонки | Предварительная идентификация вещества в сопоставлении со стандартом |
| Число теоретических тарелок (N) | Параметр эффективности | Степень участия колонки в формировании узкой зоны вещества | Оценка эффективности и качества хроматографического разделения |
| Высота, эквивалентная теоретической тарелке (ВЭТТ, H) | Параметр эффективности | Длину колонки, приходящуюся на одну условную теоретическую тарелку | Чем меньше значение, тем выше эффективность колонки |
| Высота пика | Количественный альтернативный | Максимальный уровень сигнала детектора | Может использоваться для количественной оценки, но сильнее зависит от уширения и формы пика |
Таким образом, площадь пика является основным количественным откликом хроматографического детектора. Достоверность результата определяется линейностью методики, правильностью калибровки, специфичностью разделения и контролем матричного влияния. Для судебно-химического заключения количественный результат дополнительно оценивают с учётом пределов обнаружения и количественного определения, прецизионности и неопределённости измерений. Надёжная идентификация обычно требует сочетания количественного сигнала с временем удерживания и, при необходимости, масс-спектрометрическими характеристиками.