2) расстояние между хроматографическим пиком анализируемого вещества и хроматографическим пиком внутреннего стандарта
3) абсолютное время удерживания
4) площадь или высота хроматографического пика (+)
Количественной характеристикой в газовой хроматографии служит площадь или высота хроматографического пика. Сигнал детектора формируется при элюировании вещества из колонки, а его величина при соблюдении стандартных условий связана с количеством или концентрацией анализируемого компонента. На практике чаще используют площадь пика, поскольку она учитывает весь сигнал во времени и менее зависит от формы пика и незначительного уширения зоны вещества.
Количественное определение проводят по градуировочной характеристике, построенной для стандартных растворов, либо методом внутреннего стандарта. В последнем случае сопоставляют площадь или высоту пика анализируемого вещества с аналогичным параметром пика внутреннего стандарта; это позволяет компенсировать вариации объёма введённой пробы и условий анализа. Достоверность расчёта возможна только в пределах линейного диапазона детектора и при подтверждённой специфичности метода.
Время удерживания, исправленное время удерживания и расстояние между пиками отражают преимущественно качественные и разделительные характеристики хроматограммы. Они используются для идентификации вещества, оценки эффективности разделения и сопоставления исследуемого образца со стандартом, но сами по себе не определяют его содержание. Поэтому именно площадь или высота пика являются правильным ответом.
| Параметр хроматограммы | Основное диагностическое или аналитическое значение | Использование для количественного определения |
|---|---|---|
| Абсолютное время удерживания | Время от момента ввода пробы до достижения максимумом пика детектора; применяется для идентификации компонента. | Самостоятельно не характеризует содержание вещества. |
| Исправленное время удерживания | Время удерживания с учётом времени прохождения вещества, не взаимодействующего со стационарной фазой; повышает сопоставимость результатов. | Имеет преимущественно качественное значение. |
| Расстояние между пиками | Отражает пространственное или временное разделение компонентов на хроматограмме. | Позволяет оценивать разрешение пиков, но не массу вещества. |
| Площадь пика | Интегральный отклик детектора за время прохождения компонента. | Основной количественный показатель при наличии градуировки. |
| Высота пика | Максимальная интенсивность сигнала детектора. | Может использоваться для количественного анализа при стабильной форме и ширине пиков. |
| Отношение площади пика аналита к площади пика внутреннего стандарта | Нормирует аналитический сигнал относительно добавленного стандартного вещества. | Применяется для повышения точности и компенсации вариабельности пробоподготовки и ввода пробы. |
В судебно-химическом исследовании количественная оценка особенно важна при установлении концентрации этанола, лекарственных средств, наркотических веществ и их метаболитов в биологических объектах. Результат должен сопровождаться указанием метода, калибровочного диапазона, предела количественного определения и показателей точности. При перекрывании пиков или наличии матричного эффекта количественный вывод требует подтверждения специфичности и пригодности методики.