2) оценки закономерностей наследования генотипических характеристик
3) установления корректно проведенной ПЦР
4) установления корректности электрофореза
Контрольное сопоставление генотипов, полученных из малонасыщенных биологических следов, с генотипами сотрудников, потенциально контактирующих с объектами исследования, необходимо прежде всего для выявления лабораторной контаминации. Малонасыщенные следы содержат крайне небольшое количество ДНК, поэтому даже единичные клетки, случайно внесенные экспертом, лаборантом или другим персоналом при приеме, маркировке и исследовании материала, могут амплифицироваться в ходе ПЦР и сформировать посторонний генетический профиль.
Совпадение дополнительного или неожиданного генотипического компонента с профилем сотрудника позволяет интерпретировать его как вероятный контаминационный артефакт, а не как биологический материал лица, связанного с расследуемым событием. Особенно важен такой контроль при исследовании следовых количеств ДНК и смешанных образцов, для которых характерны стохастические эффекты: выпадение аллелей, появление дисбаланса пиков и повышенная чувствительность к посторонней ДНК. Поэтому базы исключающих профилей персонала являются элементом системы обеспечения качества судебно-генетической лаборатории.
Такое сравнение не предназначено для непосредственной проверки правильности отдельных этапов ПЦР или капиллярного электрофореза. Корректность этих процессов оценивают с помощью положительных и отрицательных контролей амплификации, реагентных бланков, внутренних стандартов размеров и критериев качества электрофореграмм. Контроль генотипов персонала решает иную задачу — устанавливает возможный источник посторонней ДНК и предупреждает ошибочную судебно-экспертную интерпретацию.
| Контрольный подход | Основная цель | Типичный диагностический признак |
|---|---|---|
| Сравнение с генотипами персонала | Выявление лабораторной или преданалитической контаминации | Совпадение постороннего компонента профиля с исключающим профилем сотрудника |
| Отрицательный контроль выделения ДНК | Контроль загрязнения при экстракции | Появление аллельных пиков при отсутствии исследуемого биоматериала указывает на возможную контаминацию |
| Отрицательный контроль ПЦР | Выявление загрязнения реакционной смеси или рабочего пространства | Наличие специфических продуктов амплификации в пробе без матричной ДНК |
| Положительный контроль ПЦР | Подтверждение работоспособности реагентов и условий амплификации | Получение ожидаемого контрольного генотипического профиля |
| Внутренний стандарт электрофореза | Контроль определения размеров амплифицированных фрагментов | Корректное положение и распознавание стандартных фрагментов |
| Повторное исследование малонасыщенного следа | Оценка воспроизводимости генотипических признаков | Подтверждение устойчиво выявляемых аллелей при повторных независимых анализах |
| Анализ смешанного ДНК-профиля | Разграничение генотипических вкладов нескольких лиц | Наличие дополнительных аллелей и различающихся количественных вкладов компонентов смеси |
Для следовых количеств ДНК контроль контаминации имеет особое значение из-за высокой аналитической чувствительности современных STR-систем. Исключающие профили персонала позволяют документированно оценить происхождение неожиданного генотипического компонента и повысить надежность экспертного заключения. При подозрении на контаминацию результаты рассматривают совместно с отрицательными контролями, данными повторного исследования и обстоятельствами обращения с объектом. Такой комплексный подход снижает риск ошибочного включения постороннего генотипа в доказательственную интерпретацию.