2) гибридологическим
3) генеалогическим
4) цитогенетическим (+)
Цитогенетический метод основан на непосредственном исследовании хромосомного набора клеток. Основным результатом является кариотип — совокупность хромосом соматической клетки, оцениваемых по числу, размеру, форме, положению центромеры и характеру окрашивания. В норме соматические клетки человека содержат 46 хромосом, включая 22 пары аутосом и одну пару половых хромосом; кариотип обозначают как 46,XX или 46,XY.
Для классического анализа культивируют клетки, чаще периферические лимфоциты, останавливают их деление на стадии метафазы, подготавливают хромосомные препараты и проводят дифференциальное окрашивание. Метод выявляет числовые нарушения — моносомии, трисомии, полиплоидию, — и крупные структурные перестройки: делеции, дупликации, инверсии и транслокации. Именно непосредственная оценка морфологии и количества хромосом отличает цитогенетический подход от генеалогического, близнецового и гибридологического методов, которые анализируют закономерности наследования признаков, но не исследуют кариотип напрямую.
В медицинской и судебно-экспертной практике цитогенетические данные могут использоваться для подтверждения хромосомных синдромов, установления варианта хромосомного пола и выявления мозаицизма — наличия у одного человека клеточных линий с разными кариотипами. При этом чувствительность метода зависит от разрешающей способности микроскопического анализа и количества исследованных клеток. Мелкие изменения ДНК и точечные мутации требуют применения молекулярно-генетических методов.
| Метод | Исследуемый материал | Основной диагностический результат | Примеры выявляемых закономерностей или нарушений |
|---|---|---|---|
| Цитогенетический | Метафазные хромосомы клеток | Определение числа, размеров, формы и структуры хромосом | Трисомии, моносомии, полиплоидия, крупные делеции и транслокации |
| Молекулярно-цитогенетический | Хромосомная ДНК с флуоресцентными зондами | Прицельное выявление определённых участков хромосом | Микроделеции, амплификации, специфические транслокации, мозаицизм |
| Генеалогический | Родословные и сведения о родственниках | Тип наследования признака или заболевания | Аутосомно-доминантное, аутосомно-рецессивное, Х-сцепленное наследование |
| Близнецовый | Сравнение монозиготных и дизиготных близнецов | Оценка вклада наследственности и среды в формирование признака | Конкордантность и дискордантность заболеваний или фенотипов |
| Гибридологический | Результаты скрещивания и потомство | Анализ расщепления и сочетания наследственных признаков | Закономерности Менделя, сцепление генов, рекомбинация |
| Молекулярно-генетический | Последовательность и копийность участков ДНК | Выявление изменений на уровне генов и нуклеотидных последовательностей | Точечные мутации, небольшие инделы, варианты числа копий генов |
Кариотип записывают по международной номенклатуре, указывая общее число хромосом и выявленные изменения, например 47,XX,+21 при трисомии 21-й хромосомы. Обнаружение сбалансированной транслокации может не сопровождаться изменением фенотипа, но иметь значение для наследования и репродуктивных рисков. Нормальный результат стандартного кариотипирования не исключает микродефектов и генных мутаций. Поэтому выбор дополнительного молекулярного исследования определяется клинической задачей и предполагаемым уровнем генетического нарушения.