2) УФ-спектрофотометрия, комплексонометрия
3) фотоэлектроколориметрия, атомно-абсорбционная спектрометрия (+)
4) ИФА, бихроматно-йодометрическое титрование
Количественное определение хрома в химико-токсикологическом анализе проводят преимущественно фотоэлектроколориметрическим и атомно-абсорбционным методами. При фотоэлектроколориметрии соединения хрома, чаще шестивалентного, переводят в окрашенную форму; классической реакцией является образование малиново-фиолетового комплекса с 1,5-дифенилкарбазидом. Интенсивность окраски измеряют по оптической плотности, которая в рабочем диапазоне пропорциональна концентрации вещества согласно закону Бугера—Ламберта—Бера.
Атомно-абсорбционная спектрометрия основана на атомизации пробы и измерении поглощения света атомами хрома на специфической резонансной длине волны. Метод отличается высокой чувствительностью, элементной селективностью и пригодностью для анализа биологических объектов после минерализации; при этом обычно определяется суммарное содержание хрома, а разграничение Cr(III) и Cr(VI) требует предварительного разделения или отдельной процедуры специирования. Таким образом, сочетание фотоэлектроколориметрии и атомно-абсорбционной спектрометрии соответствует практическим задачам количественного химико-токсикологического исследования.
| Метод | Аналитический принцип | Применение при определении хрома | Основные особенности |
|---|---|---|---|
| Фотоэлектроколориметрия | Измерение оптической плотности окрашенного комплекса | Количественное определение, особенно Cr(VI) после реакции с дифенилкарбазидом | Доступность, необходимость холостой пробы и калибровочного графика |
| Атомно-абсорбционная спектрометрия | Поглощение резонансного излучения свободными атомами хрома | Определение низких концентраций хрома в минерализатах и биологических образцах | Высокая чувствительность и селективность; возможны матричные интерференции |
| Прямая УФ-спектрофотометрия | Измерение собственного поглощения вещества в ультрафиолетовой области | Ограниченное применение без специфической цветной реакции | Ниже специфичность, влияние сопутствующих компонентов пробы |
| Комплексонометрия | Титрование с образованием устойчивого хелатного комплекса | Не относится к основным рутинным методам определения следовых количеств хрома | Требует маскирования мешающих ионов и строгого контроля условий реакции |
| Гравиметрия | Взвешивание выделенного малорастворимого соединения | Практически непригодна для малых концентраций в биологическом материале | Низкая чувствительность, трудоемкость и значительный расход пробы |
| ИФА | Иммунохимическое взаимодействие антиген—антитело | Не является стандартным методом для неорганического хрома | Предназначен главным образом для макромолекулярных антигенов и специфических биомаркеров |
| Бихроматно-йодометрическое титрование | Окислительно-восстановительное титрование с участием дихромата и йода | Не является типичным валидированным способом определения следовых количеств хрома в токсикологической пробе | Недостаточная селективность и выраженное влияние сопутствующих восстановителей и окислителей |
Перед измерением биологический материал обычно подвергают минерализации с последующим переводом хрома в раствор и контролем полноты извлечения. Для достоверной количественной оценки используют калибровочные растворы, холостые пробы, контрольные образцы и оценку предела обнаружения. При интерпретации результата учитывают химическую форму хрома, поскольку токсикологические свойства Cr(VI) существенно отличаются от свойств Cr(III). Сочетание колориметрического скрининга с подтверждением методом атомно-абсорбционной спектрометрии повышает аналитическую надежность исследования.